Питательная агаризованная среда HiMedia MCD1575A-500G Модифицированный HiCrome ECO157 HiCynth агар предназначена для селективного выделения и визуального обнаружения Escherichia coli O157:H7 в пищевых образцах. Среда использует сорбитол и хромогенную смесь для дифференциации колоний, а селективность обеспечивается добавлением селективной добавки NP Selective Supplement FD187.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного выделения и упрощённого обнаружения Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов.

Назначение изделия: агар
Форма выпуска: порошок
Масса: 500 г
Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
Происхождение основы: химически определённая среда HiCynth™
Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)

Состав

Состав рассчитан на 1 л среды.

Примечания:
** — формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

— пептоны с химически определённым составом.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении, соответствующем 15 фунтам на кв. дюйм (≈0,10 МПа), при температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NP Selective Supplement FD187.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагические штаммы Escherichia coli также называют штаммами, продуцирующими вероцитотоксин (VTEC/EHEC). Различные серотипы Escherichia coli способны продуцировать вероцитотоксин, однако Escherichia coli O157:H7 относятся к наиболее распространённым типам, вызывающим инфекции у человека.

Штаммы O157 VTEC обладают рядом необычных биохимических признаков, используемых для лабораторной идентификации. Они относятся к меньшинству штаммов E. coli, отрицательных по β-глюкуронидазе, и не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 ч. Для выделения таких микроорганизмов из фекальных образцов применяют посев на среды, содержащие D-сорбитол вместо лактозы.

HiCrome® EC O157:H7 Agar основан на составе, описанном Rappaport и Henigh. Модифицированный HiCrome® HiCynth™ EC O157:H7 Agar создан на основе этой рецептуры с заменой пептонов животного и растительного происхождения на синтетические пептоны для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), а также генетически модифицированными организмами (ГМО).

В среде сорбитол используется как ферментируемый углевод, а хромогенная смесь — вместо лактозы и индикаторных красителей. Хромогенный субстрат специфически и селективно расщепляется Escherichia coli O157:H7 с образованием окрашенного соединения от тёмно-фиолетового до пурпурно-малинового цвета. Колонии E. coli приобретают голубовато-зелёную окраску.

Пептоны HiCynth™ № 1 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью, витаминами и питательными веществами, необходимыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление селективной добавки NP Selective Supplement FD187 придаёт среде селективные свойства.

Теллурит калия селективно подавляет рост видов Aeromonas и Providencia. Новобиоцин подавляет грамположительные бактерии. Лаурилсульфат натрия способствует подавлению сопутствующей грамположительной микрофлоры.

Исследуемые образцы

Тип образца: пищевые продукты и пищевые образцы.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам и лабораторным процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде вариабельные характеристики роста.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,18 % масс./об. при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки NP Selective Supplement FD187 и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.