HiMedia MCD1575A-100G Модифицированный HiCrome ECO157 HiCynth агар

Питательная селективная хромогенная агаровая среда HiMedia MCD1575A-100G Модифицированный HiCrome ECO157 HiCynth агар производства HiMedia предназначена для селективного выделения и визуального обнаружения Escherichia coli O157:H7 в пищевых образцах. Среда содержит сорбитол и хромогенную смесь, а характерный цвет колоний Escherichia coli O157:H7 — от тёмно-пурпурного до пурпурно-розового; масса упаковки составляет 100 г.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения и облегчённого обнаружения Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Пептоны HiCynth™ имеют химически определённый состав.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 31,85 г среды в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NP (FD187).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Энтерогеморрагические штаммы Escherichia coli также называют штаммами, продуцирующими вероцитотоксин (VTEC/EHEC). Известно множество серотипов Escherichia coli, способных продуцировать вероцитотоксин, однако штаммы Escherichia coli O157:H7 относятся к наиболее распространённым причинам инфекций у человека.

Штаммы VTEC O157 обладают рядом необычных биохимических свойств, используемых для лабораторной идентификации. Они относятся к меньшинству штаммов E. coli, которые являются β-глюкуронидазоотрицательными и не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 ч. Такие микроорганизмы можно выделять из фекальных образцов посевом на среды, содержащие D-сорбитол вместо лактозы.

HiCrome® EC O157:H7 Agar основан на составе, описанном Rappaport и Henigh. HiCrome® HiCynth™ EC O157:H7 Agar представляет собой модификацию этой среды, в которой животные и растительные пептоны заменены синтетическими пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE), трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE) и генетически модифицированными организмами (GMO).

Среда содержит сорбитол в качестве ферментируемого углевода, а хромогенную смесь — вместо лактозы и индикаторных красителей соответственно. Хромогенный субстрат специфически и избирательно расщепляется Escherichia coli O157:H7 с образованием окрашенного соединения от тёмно-пурпурного до пурпурно-розового цвета. Колонии E. coli имеют голубовато-зелёную окраску.

Пептоны HiCynth™ № 1 и № 5 обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и питательными веществами, необходимыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление селективной добавки NP (FD187) придаёт среде селективные свойства.

Теллурит калия избирательно ингибирует виды Aeromonas и Providencia. Новобиоцин ингибирует грамположительные бактерии. Лаурилсульфат натрия способствует ингибированию сопутствующей грамположительной микрофлоры.

Тип образца

• Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные варианты роста на данной среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный, свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,18 % м/об при 25 °C.

• pH: 6,8 ± 0,2.

pH

• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки NP (FD187) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок год