HiMedia MCD1571-500G HiCrome M-TEC HiCynth агар

Хромогенный агар HiMedia MCD1571-500G HiCrome M-TEC HiCynth для дифференциации и подсчёта термотолерантных штаммов Escherichia coli в воде. Рекомендуется агентством по охране окружающей среды США (USEPA) для использования методом мембранной фильтрации, а также подходит для анализа клинических образцов.

Принцип измерения

Среда HiCrome® M-TEC основана на использовании хромогенного субстрата 5-бром-6-хлоро-3-индолил-β-D-глюкуронида. Фермент β-D-глюкуронидаза, вырабатываемый штаммами E. coli, расщепляет этот субстрат с высвобождением глюкуроновой кислоты, что придает колониям E. coli характерный пурпурно-малиновый цвет.

В данной модификации (HiCynth™) вместо растительных и животных пептонов используются химически определенные пептоны (HiCynth™ Peptone No.3 и No.5), что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией) и использования ГМО.

Функции компонентов:

• Химически определенные пептоны: источники углерода, азота, аминокислот, витаминов и основных питательных веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Гидрофосфат калия и дигидрофосфат калия: создают мощную буферную систему для контроля pH при ферментативном действии.
• Лаурилсульфат натрия (SLS) и дезоксихолат натрия: подавляют рост грамположительных бактерий, повышая селективность среды.

Область применения

• Пробы воды: определение и количественный подсчёт термотолерантных E. coli (TEC) методом мембранной фильтрации.
• Клинические образцы: выделение E. coli из мочи и других биоматериалов.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: суспендируйте 45,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: автоклавируйте при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Разлив: охладите среду до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
5. Посев: мембранный фильтр, через который была пропущена проба воды, асептически помещают на поверхность среды.
6. Инкубация: plates инкубируют при температуре 44,5 $\pm$ 0,2 °C в течение 22–24 часов.
7. Интерпретация: колонии E. coli окрашиваются в пурпурный или малиновый цвет.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические показатели

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция (pH 4,56 % водного раствора при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 44,5 $\pm$ 0,2 °C в течение 22–24 часов.

Дополнительные параметры

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +15…+25 °C в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта следует избегать попадания влаги для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и предостережения

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов на среде.
• Рекомендуется проводить валидацию среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).
• Для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• Только для диагностики in vitro. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.