HiMedia MCD1465-500G Быстрый HiColiform HiCynth агар

Быстрый хромогенно-флуорогенный агар HiMedia MCD1465-500G HiColiform HiCynth для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформ. Применяется для анализа проб воды и клинического материала; основан на использовании синтетических пептонов HiCynth™ для исключения рисков БЭП/ТСЭ и ГМО.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию бульона LMX. В основе метода лежит реакция ферментных субстратов:

• Общие колиформы: наличие указывается сине-зелёным цветом колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• Escherichia coli: специфический фермент $\beta$-D-глюкуронидаза расщепляет флуорогенный субстрат, что вызывает синюю флуоресценцию под УФ-светом.
• Синтез ферментов: IPTG (1-изопропил-$\beta$-D-1-тиогалактопиранозид) усиливает синтез и активность $\beta$-D-галактозидазы.

Роль компонентов:

• Синтетический пептон HiCynth™ №1 с высоким содержанием триптофана обеспечивает питательную среду и позволяет одновременно определять продукцию индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли поддерживают буферную емкость для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия (SLS) делает среду селективной, подавляя рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Интерпретация результатов

• Первичный анализ: визуальная оценка цвета колоний и проверка флуоресценции под УФ-лампой.
• Подтверждение E. coli: нанести 2–3 капли реактива Ковакса на подозрительную колонию. Положительная реакция (продукция индола) проявляется в виде красного окрашивания в течение 2 минут.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Ступень гелеобразования: плотный гель (сопоставим с 1,5 % агаром)
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Тип продукта: HiCynth™ (химически определенный)
• Форма выпуска: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и работа с образцами

• Типы образцов: пробы воды, клинический материал (например, моча).
• Сбор и обработка: при работе с клиническими и водными пробами следует руководствоваться установленными стандартами и местными нормативными документами.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения и предупреждения

• Около 97 % штаммов E. coli являются $\beta$-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут не проявлять флуоресценцию.
• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• При работе использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, очки).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.