Питательная агаровая среда HiMedia MCD1465-500G Быстрый HiColiform HiCynth агар производства HiMedia с химически определённым составом и хромогенными и флуорогенными субстратами. Среда предназначена для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и клиническом материале; масса упаковки — 500 г.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе ферментативной субстратной реакции с использованием комбинации хромогенных и флуорогенных субстратов. Допускается применение для клинических образцов, включая мочу.

Состав

Расход компонентов указан в граммах на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. В составе используются химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация результатов

Rapid HiColiform™ HiCynth™ Agar представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Принцип среды основан на одновременном выявлении общих колиформных бактерий и Escherichia coli с применением синтетических пептонов вместо пептонов животного и растительного происхождения, что исключает риски, связанные с BSE/TSE и генетически модифицированными организмами.

• Пептон HiCynth™ № 1 с высоким содержанием триптофана обеспечивает необходимые питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт ингибирования сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.
• Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, которая специфично обнаруживается у Escherichia coli. Положительная реакция проявляется синей флуоресценцией колоний при ультрафиолетовом освещении.
• Наличие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.
• Для подтверждения присутствия E. coli на подозрительную колонию добавляют 2–3 капли реактива Ковача. При положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: моча.
• Образцы воды.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и защиту лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• 97 % штаммов E. coli являются положительными по β-D-глюкуронидазе, однако у отдельных штаммов флуоресценция может отсутствовать.
• Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
• Для выявления конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется предварительно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Ожидаемые характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 3,1%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

pH

6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ранее продукт был известен как Enterobacter aerogenes

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Порошок храните при 15–25 °C в плотно закрытом контейнере, приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию.

Храните контейнер в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие модификации HiCynth

В Rapid HiColiform HiCynth агаре пептоны животного и растительного происхождения заменены синтетическими химически определёнными пептонами; при этом одновременное выявление общих колиформных бактерий и Escherichia coli выполняется по хромогенной и флуорогенной реакциям.

Совместимые реагенты и принадлежности

Для подтверждения E. coli используется реактив Ковача: 2–3 капли наносят непосредственно на подозрительную колонию; положительная реакция проявляется красным окрашиванием в течение 2 мин.