HiMedia MCD1465-100G Быстрый HiColiform HiCynth агар

Питательная агаровая среда HiMedia MCD1465-100G Быстрый HiColiform HiCynth агар — сухая химически определённая среда массой 100 г для микробиологического анализа. HiMedia MCD1465-100G предназначена для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и клиническом материале с использованием хромогенного и флуорогенного субстратов.

Назначение

Среда рекомендована для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе фермент-субстратной реакции с использованием комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов. Также применяется для исследования клинического материала.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих параметров.

Пептоны имеют химически определённый состав.

Принцип измерения и интерпретация

Быстрый агар HiColiform представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Быстрый агар HiColiform HiCynth работает по тому же принципу, но животные и растительные пептоны заменены синтетическими пептонами для исключения риска губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота, трансмиссивных губчатых энцефалопатий и генетически модифицированных организмов.

Среда предназначена для одновременного обнаружения общих колиформных бактерий и Escherichia coli в пробах воды по реакциям с хромогенным и флуорогенным субстратами. Среда также может использоваться для клинических образцов.

• Пептон HiCynth™ № 1 с высоким содержанием триптофана обеспечивает основные питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.
• Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, характерным для Escherichia coli. Положительная реакция проявляется синей флуоресценцией колоний при ультрафиолетовом освещении.
• Наличие общих колиформных бактерий указывает сине-зелёная окраска колоний, возникающая при расщеплении хромогенного субстрата.
• IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.
• Для подтверждения присутствия E. coli на подозрительную колонию наносят 2–3 капли реактива Ковача. При положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Клинические образцы: моча.
• Пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности могут содержаться в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

• 97 % штаммов E. coli являются положительными по β-D-глюкуронидазе, однако отдельные штаммы могут демонстрировать отрицательную флуоресценцию.
• Каждая серия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. Для выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 3,1%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Среда ранее выпускалась под наименованием Enterobacter aerogenes.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются в течение указанного срока годности при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие

В отличие от сред на основе животных и растительных пептонов, HiMedia MCD1465-100G использует химически определённые синтетические пептоны HiCynth™ для одновременного выявления общих колиформных бактерий и Escherichia coli.

Условия применения

Среда предназначена для лабораторного микробиологического анализа образцов воды и клинического материала; работа с образцами и культурами требует соблюдения правил биологической безопасности и стерильности.