HiMedia MCD145-500G Основа Columbia HiCynth бульона

Порошкообразная питательная среда HiMedia MCD145-500G Основа Columbia HiCynth бульона — химически определённая основа для приготовления жидкой питательной среды, масса упаковки 500 г. Применяется для общего культивирования и выделения требовательных микроорганизмов из пищевых образцов; отдельные требовательные виды могут расти слабо или подавляться.

Назначение и область применения

Основа Columbia HiCynth бульона предназначена для приготовления универсальной жидкой питательной среды, а также для культивирования требовательных микроорганизмов из различных образцов.

Тип образца: пищевые образцы.

Для пищевых образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными процедурами.

Состав

Состав, г/л:

** Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим параметрам.

* Пептон с химически определённым составом.

Происхождение основы: химически определённая основа HiCynth™.

Технические характеристики

Масса: 500 г.

Назначение изделия: основа.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. При необходимости добавьте полисульфонат натрия (SPS, полиянионный антикоагулянт) до конечной концентрации 0,01 %.
4. Разлейте среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Принцип действия и интерпретация

В 1969 году Morello и Ellner разработали жидкую среду для выделения микроорганизмов из гемокультур. Среда была создана на основе агара Columbia для посева крови, ранее разработанного Ellner и соавторами.

При изучении среды было установлено, что бульон Columbia превосходит распространённый бульон общего назначения по скорости роста Staphylococcus aureus, Escherichia coli, стрептококков группы viridans и групп Enterococcus. Повышенная концентрация цистеина в составе предназначена для улучшенного выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов из образцов крови.

Бульон Columbia HiCynth™ получают заменой пептонов животного и растительного происхождения на пептоны с химически определённым составом, что позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Присутствие CO₂ стимулирует рост многих микроорганизмов. По сравнению с агаровой основой в составе отсутствует кукурузный крахмал, что снижает опалесценцию среды; дополнительно введены соли.

Функции компонентов:

• пептон HiCynth™ № 3 поддерживает обильный рост микроорганизмов;
• декстроза служит источником углерода и энергии;
• трис-буфер поддерживает буферную ёмкость среды;
• добавление солей улучшает выделение микроорганизмов;
• L-цистеина гидрохлорид выполняет функцию восстановителя;
• магний и железо способствуют росту микроорганизмов;
• полисульфонат натрия (SPS) как полиянионный антикоагулянт ингибирует активность комплемента и лизоцима, подавляет фагоцитоз и инактивирует аминогликозиды.

Полисульфонат натрия оказывает ингибирующее действие на виды Neisseria; добавление желатина в концентрации 1,2 % может уменьшить этот ингибирующий эффект.

Рост в пробирках определяют по появлению мутности по сравнению с неинокулированным контролем. При появлении роста культуры необходимо пересевать на соответствующие питательные среды.

Подготовка и инокуляция образцов

• Среду в пробирках инокулируют 1–2 каплями жидкого образца с использованием стерильной пипетки.
• Тампоны с образцами можно помещать в бульон после инокуляции чашек с плотной средой.
• Для анаэробной инкубации жидкую среду необходимо восстановить: поместить пробирки с ослабленными крышками в анаэробные условия на 18–24 ч до инокуляции.
• В качестве альтернативы среду можно восстановить непосредственно перед использованием: прокипятить с ослабленными крышками, охладить до комнатной температуры, затем плотно закрыть крышки и выполнить инокуляцию.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий; возможно наличие мелкодисперсного осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,5 % мас./об. при 25 °C.

pH: 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Каждая партия среды проверяется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать пригодность среды с учётом индивидуальных требований.

Ограничения применения

1. Микроорганизмы различаются по потребностям в питательных веществах; некоторые требовательные организмы могут подавляться или демонстрировать слабый рост.
2. Для полной идентификации необходимо дополнительно выполнить биохимические и серологические исследования.
3. Добавление полисульфоната натрия может ингибировать виды Neisseria; для снижения ингибирующего действия допускается добавление 1,2 % желатина.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом виде.
• Порошок обладает гигроскопичностью; при попадании влаги возможно образование комков.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются на оптимальном уровне при использовании в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и