HiMedia MCD145-500G Основа Columbia HiCynth бульона

Универсальная питательная среда HiMedia MCD145-500G Основа Columbia HiCynth бульона на базе химически определенного пептона. Применяется для культивирования широкого спектра микроорганизмов, включая требовательные виды, из различных образцов, в том числе пищевых.

Принцип измерения

Среда разработана на основе Columbia Blood Agar Base для эффективного выделения микроорганизмов. В сравнении с обычными бульонами общего назначения, Columbia HiCynth бульон обеспечивает более быстрый рост Staphylococcus aureus, Escherichia coli, групп вириданс-стрептококков и Enterococcus.

Повышенная концентрация цистина способствует улучшенному восстановлению как аэробных, так и анаэробных микроорганизмов. Использование химически определенного пептона HiCynth™ Peptone No.3 исключает риски, связанные с BSE/TSE (губчатой энцефалопатией), которые характерны для пептонов животного и растительного происхождения.

Функциональные компоненты среды:

• HiCynth™ Peptone No.3: обеспечивает обильный рост организмов.
• Декстроза (глюкоза): источник углерода и энергии.
• Трис-буфер: стабилизирует pH среды.
• L-цистеин гидрохлорид: выступает в роли восстановителя.
• Сульфаты магния и железа: стимулируют рост микроорганизмов.
• Соли: улучшают восстановление организмов.

При необходимости может быть добавлен SPS (натрия полианетолсульфонат) в конечной концентрации 0,01 %. Этот полианионный антикоагулянт подавляет активность комплемента и лизоцима, препятствует фагоцитозу и инактивирует аминогликозиды.

Методика приготовления и применения

Приготовление среды

1. Растворить 35,01 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. При необходимости добавить SPS до конечной концентрации 0,01 %.
4. Разлить среду в пробирки или колбы.
5. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.

Процедура инокуляции

• Жидкие образцы: вносить по 1–2 капли стерильной пипеткой.
• Мазки: вводить в бульон после посева на плотные среды.
• Для анаэробной инкубации: пробирки с неплотно закрытыми крышками следует выдерживать в анаэробных условиях 18–24 часа до инокуляции. Альтернативно — прокипятить с неплотно закрытыми крышками, затем плотно закрыть и охладить до комнатной температуры.

Интерпретация результатов

Рост микроорганизмов в пробирках определяется по появлению помутнения по сравнению с неинокулированным контролем. При обнаружении роста следует провести пересев культур на соответствующие селективные среды.

Особенности:

• Присутствие CO₂ стимулирует рост многих организмов.
• Добавление SPS может подавлять рост видов Neisseria; для нейтрализации этого эффекта рекомендуется добавить 1,2 % желатина.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-янтарный раствор, от прозрачного до слегка опалесцирующего, возможен мелкий осадок.
• Реакция 3,5% водного раствора при 25 °C: pH 7,5 ± 0,2 (диапазон 7,30–7,70).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для общего использования и культивирования требовательных организмов из пищевых образцов.

Ограничения:

• Из-за различий в трофических потребностях некоторые требовательные организмы могут расти плохо или подавляться.
• Для полной идентификации микроорганизмов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Рекомендуется валидация среды для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация: все загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.