HiMedia MCD144A-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с 1% агара

Питательная среда HiMedia MCD144A-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с 1% агара — сухая порошкообразная основа с химически определённым пептоном HiCynth™ для приготовления обогащённых и селективных сред. Применяется для выделения и культивирования требовательных к условиям роста бактерий из различных образцов, при этом Haemophilus influenzae на среде не растёт из-за отсутствия фактора V.

Назначение

Основа питательной среды предназначена для приготовления сред с добавлением крови или без неё, а также селективных сред для выделения и культивирования требовательных к условиям роста бактерий из различных образцов.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав, г/л:

* Химически определённый пептон.
** Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 39 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите до 45–50 °C перед добавлением термочувствительных компонентов.

Приготовление кровяного агара

В стерильную охлаждённую основу добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы.

Приготовление шоколадного агара

В стерильную охлаждённую основу добавьте 10 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы. Нагревайте до 80 °C в течение 10 мин при постоянном перемешивании.

Селективную среду можно получить добавлением различных противомикробных препаратов в стерильную основу.

Добавки для специализированных сред

• Для Brucella: добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для Campylobacter: добавьте восстановленное содержимое 1 флакона одной из следующих селективных добавок: Blaser–Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106), а также восстановленное содержимое 1 флакона минеральной ростовой добавки (FD009) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для Gardnerella: добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки GNA (FD056) к 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для кокков: добавьте восстановленное содержимое 1 флакона одной из селективных добавок NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа с 1 % агара представляет собой универсальную питательную агаровую основу, разработанную Ellner и соавторами в 1966 году. Среда дополнительно обогащается стерильной кровью.

Традиционные основы кровяного агара содержат либо гидролизат казеина, обеспечивающий быстрое формирование крупных колоний, либо мясной экстракт, позволяющий получать определённые гемолитические реакции. Колумбийская основа сочетает оба компонента для обеспечения роста микроорганизмов и визуализации характерных признаков.

Кровяная агаровая основа Columbia Blood HiCynth™ с 1 % агара является модификацией этой среды, в которой животные и растительные пептоны заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Добавление пептона HiCynth™ № 3 поддерживает быстрый и обильный рост требовательных и нетребовательных к условиям культивирования микроорганизмов. Среда также способствует формированию типичной морфологии колоний, улучшает образование пигмента и обеспечивает более чёткие гемолитические реакции.

Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты. Кровь овцы обеспечивает выявление гемолиза и поставляет гем, или фактор X, необходимый для роста многих бактерий. Кровь овцы не содержит фактор V — никотинамидадениндинуклеотид; поэтому Haemophilus influenzae, которому необходимы оба фактора X и V, на этой среде не растёт.

Из-за относительно высокого содержания углеводов β-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз. Для всех колоний необходимо проводить подтверждающие тесты.

Среда используется как основа для приготовления кровяных сред и селективных сред с различными комбинациями противомикробных добавок. Основа HiCynth™ с 1 % агара при добавлении стерильной сыворотки обеспечивает эффективную среду для проверки вирулентности Corynebacterium diphtheriae.

Специальные рекомендации по культивированию

После выполнения установленной методики для C. diphtheriae линии преципитации токсин–антитоксин чётко видны через 48 ч.

Многие патогенные микроорганизмы требуют наличия углекислого газа, поэтому чашки можно инкубировать в атмосфере, содержащей приблизительно 3–10 % CO₂.

Меры предосторожности при культивировании

• Культуры Brucella обладают высокой инфекционностью и требуют осторожного обращения; инкубируйте культуры в атмосфере с 5–10 % CO₂.
• Виды Campylobacter лучше всего растут при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Чашки с добавками для Gardnerella следует инкубировать при 35 °C в течение 48 ч в атмосфере с 7 % CO₂.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный гель светло-янтарного цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,9 % масс./об. при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Культуральные характеристики

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до