HiMedia MCD144A-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с 1% агара

Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с 1% агара HiMedia MCD144A-500G. Базовая питательная среда для изоляции и культивирования требовательных бактерий из различных образцов, включая пищевые продукты.

Принцип измерения

Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с 1% агара представляет собой универсальную питательную среду, разработанную по методу Эллнера и др. (1966 г.), модифицированную путем замены животных и растительных пептонов на химически определенные пептоны HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии).

Среда сочетает в себе свойства гидролизата казеина (для быстрого роста крупных колоний) и мясного настоя (для четких гемолитических реакций). Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты. При добавлении крови овечьи эритроциты позволяют определять гемолиз и обеспечивают наличие фактора X (гема). Среда не содержит фактора V (никотинамидадениндинуклеотида), поэтому Haemophilus influenzae, требующий обоих факторов, на ней не растет.

Область применения

Используется как база для приготовления:

• Кровяных агаров (для выявления гемолиза и роста требовательных микроорганизмов).
• Шоколадного агара.
• Селективных сред с добавлением антимикробных агентов.
• Среды для теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae (при добавлении стерильной сыворотки).

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Растворить 39 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Варианты модификации

• Кровяной агар: добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы в охлажденную стерильную основу.
• Шоколадный агар: добавить 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы в охлажденную стерильную основу. Нагревать при 80 °C в течение 10 минут при постоянном перемешивании.
• Для видов Brucella: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Campylobacter: добавить содержимое 1 флакона одной из добавок: Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106), а также 1 флакон минеральной добавки Minerals Growth Supplement (FD009) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Gardnerella: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки GNA (FD056) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для кокков: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) на 500 мл стерильной расплавленной основы.

Условия культивирования и интерпретация

• Общие требования: многим патогенам требуется углекислый газ, поэтому посевы инкубируют в атмосфере с содержанием 3–10 % CO₂.
• C. diphtheriae: линии преципитации токсина-антитоксина становятся отчетливо видны через 48 часов.
• Brucella: высокая инфекционность, строгое соблюдение мер предосторожности; инкубация в 5–10 % CO₂.
• Campylobacter: оптимальный рост при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Gardnerella: инкубация при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере 7 % CO₂.

Ограничения: из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз. Требуется проведение подтверждающих тестов.

Технические характеристики

Состав, г/л

Спецификации

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 3,9 % водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики (контроль качества)

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с правилами работы с инфекционными материалами.