HiMedia MCD144-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара

Основа сухой питательной среды HiMedia MCD144-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара с использованием химически определенного пептона. Применяется для приготовления кровяного, шоколадного, а также различных селективных и идентификационных сред; вес упаковки 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Основа колумбийского кровяного HiCynth агара представляет собой питательную среду общего назначения, разработанную по методу Ellner et al (1966) и дополнительно обогащенную стерильной кровью. В отличие от традиционных основ, которые используют либо гидролизат казеина (для быстрого роста крупных колоний), либо мясной настой (для четких гемолитических реакций), данная среда объединяет оба подхода для улучшения общих эксплуатационных характеристик.

В модификации HiCynth™ животные и растительные пептоны заменены химически определенными пептонами (HiCynth™ Peptone No.3), что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией), связанные с использованием компонентов животного происхождения.

Особенности работы компонентов:

• HiCynth™ Peptone No.3: обеспечивает быстрый и обильный рост как требовательных, так и нетребовательных микроорганизмов, способствует типичной морфологии колоний, лучшей выработке пигмента и более четким гемолитическим реакциям.
• Кукурузный крахмал: служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты.
• Овечья кровь: позволяет определять гемолиз и обеспечивает наличие гем (X-фактор), необходимых для роста многих бактерий.

Ограничения:

• Среда не содержит V-фактор (никотинамидадениндинуклеотид), поэтому Haemophilus influenzae, требующий обоих факторов (X и V), на ней не растет.
• Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз. Требуется проведение подтверждающих тестов для всех колоний.

Область применения

Среда используется для анализа образцов пищевых продуктов. Также служит базой для приготовления селективных сред с добавлением антимикробных агентов или сред с добавлением стерильной сыворотки для проведения теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Приготовление специализированных сред

• Кровяной агар: к стерильной охлажденной основе добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы.
• Шоколадный агар: к стерильной охлажденной основе добавить 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы. Нагревать при 80 °C в течение 10 минут при постоянном перемешивании.
• Для видов Brucella: добавить содержимое 1 регидратированного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Campylobacter: добавить содержимое 1 регидратированного флакона одной из селективных добавок: Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106) на 500 мл стерильной расплавленной основы, а также содержимое 1 флакона добавки Minerals Growth Supplement (FD009) и 5–7 % (об/об) крови лошади или овцы.
• Для видов Gardnerella: добавить содержимое 1 регидратированного флакона селективной добавки GNA (FD056) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для кокков: добавить содержимое 1 регидратированного флакона селективной добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) на 500 мл стерильной расплавленной основы.

Условия инкубации и предосторожности

• Многие патогены требуют CO₂; в таких случаях чашки инкубируют в атмосфере с содержанием CO₂ примерно 3–10 %.
• Культуры Brucella крайне инфекционны; инкубировать при 5–10 % CO₂.
• Виды Campylobacter лучше всего растут при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Среды с добавками для Gardnerella инкубируют при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере с 7 % CO₂.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Контроль качества

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % стерильной дефибринированной крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 7,10–7,50 (для 4,4 % водного раствора при 25 °C составляет 7,3 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасной утилизации путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.