HiMedia MCD144-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара

Питательная среда HiMedia MCD144-500G Основа колумбийского кровяного HiCynth агара производства HiMedia с химически определённой пептонной основой HiCynth™. Основа применяется для приготовления кровяного и шоколадного агара, селективных и дифференциально-диагностических сред; форма выпуска — порошок, масса 500 г.

Назначение

Основа колумбийского кровяного HiCynth-агара применяется для приготовления:

• кровяного агара;
• шоколадного агара;
• различных селективных сред;
• идентификационных и дифференциально-диагностических сред;
• среды для тестирования вирулентности Corynebacterium diphtheriae при добавлении стерильной сыворотки.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

* Химически определённый пептон.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация

Основа колумбийского кровяного агара с 1 % агара представляет собой питательную агаровую основу общего назначения, разработанную Ellner и соавторами в 1966 году и предназначенную для дальнейшего обогащения стерильной кровью.

Традиционно в основы кровяного агара добавляли либо гидролизат казеина для быстрого образования крупных колоний, либо мясной экстракт для получения выраженных гемолитических реакций. Колумбийская среда сочетает оба подхода.

Основа колумбийского кровяного HiCynth-агара с 1 % агара представляет собой модификацию этой среды, в которой пептоны животного и растительного происхождения заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Добавление пептона HiCynth™ № 3 обеспечивает быстрый и обильный рост требовательных и нетребовательных микроорганизмов, способствует формированию типичной морфологии колоний, улучшенной продукции пигмента и более чётких гемолитических реакций.

Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты. Баранья кровь позволяет выявлять гемолиз и обеспечивает гемом, или фактором X, необходимым для роста многих бактерий. При этом в среде отсутствует фактор V — никотинамид-адениндинуклеотид, поэтому Haemophilus influenzae, которому необходимы оба фактора X и V, на этой среде не растёт.

Из-за относительно высокого содержания углеводов β-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую гемолитическую реакцию, которую можно ошибочно принять за α-гемолиз. Для всех колоний необходимо выполнять подтверждающие тесты.

Основа колумбийского кровяного HiCynth-агара с 1 % агара используется для приготовления сред с кровью и селективных сред, в которых в качестве добавок применяют различные комбинации противомикробных препаратов.

Основа HiCynth-агара с 1 % агара при добавлении стерильной сыворотки обеспечивает эффективную среду для тестирования вирулентности Corynebacterium diphtheriae. При выполнении установленной методики для C. diphtheriae линии преципитации токсин–антитоксин отчётливо видны через 48 ч.

Многие патогенные микроорганизмы нуждаются в углекислом газе, поэтому чашки можно инкубировать в атмосфере, содержащей приблизительно 3–10 % CO₂.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 45–50 °C перед добавлением термочувствительных компонентов.

Приготовление кровяного агара

Добавьте 5 % по объёму стерильной дефибринированной бараньей крови к стерильной охлаждённой основе.

Приготовление шоколадного агара

1. Добавьте 10 % по объёму стерильной дефибринированной бараньей крови к стерильной охлаждённой основе.
2. Нагревайте до 80 °C в течение 10 мин при постоянном перемешивании.

Селективную среду можно получить добавлением различных противомикробных препаратов к стерильной основе.

Селективная среда для Brucella

Добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Селективные среды для Campylobacter

К 500 мл стерильной расплавленной основы добавьте:

• восстановленное содержимое одного флакона одной из селективных добавок: Blaser–Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090), Butzler VI (FD106);
• восстановленное содержимое одного флакона минеральной ростовой добавки (FD009);
• 5–7 % по объёму конской или бараньей крови.

Селективная среда для Gardnerella

Добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки GNA (FD056) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Селективная среда для кокков

Добавьте восстановленное содержимое одного флакона одной из селективных добавок: NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Условия культивирования

• Патогенные микроорганизмы, которым требуется углекислый газ: инкубация в атмосфере с приблизительно 3–10 % CO₂.
• Brucella: инкубация в атмосфере с 5–10 % CO₂; культуры высокоинфекционны и требуют осторожного обращения.
• Campylobacter: оптимальный рост при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Чашки с добавками для Gardnerella: инкубация при 35 °C в течение 48 ч в атмосфере с 7 % CO₂.
• Corynebacterium diphtheriae: при выполнении установленной методики линии преципитации токсин–антитоксин отчётливо видны через 48 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением 5 % по массе стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5 % по массе стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,4 % водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении согласно инструкции на этикетке, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методики отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Некоторые требовательные