Питательная агаровая среда HiMedia MCD1418-100G Модифицированный HiCrome UTI HiCynth агар производства HiMedia в форме порошка предназначена для идентификации, дифференциации и подтверждения энтеробактерий, включая анализ образцов мочи с возможным присутствием большого количества видов Proteus. Среда содержит химически определённые пептоны HiCynth™, хромогенную смесь и позволяет различать микроорганизмы по цвету колоний и результатам реакций с реагентами TDA и DMACA.

Назначение

Среда рекомендована для идентификации, дифференциации и подтверждения энтеробактерий в образцах, которые могут содержать большое количество видов Proteus, а также потенциально патогенных грамположительных микроорганизмов.

Типы образцов:

• клинические образцы: моча, фекалии;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

Среда предназначена для применения in vitro и только профессиональными пользователями.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Пептон является химически определённым.

Принцип действия и интерпретация результатов

Модифицированный агар HiCrome® UTI HiCynth™ разработан на основе исследований Pezzlo, Wilkie и соавторов, Friedman и соавторов, Murray и соавторов, Soriano и Ponte, Merlino и соавторов.

Среда представляет собой модификацию агара HiCrome® UTI HiCynth™ (MCD1353) и может использоваться вместо агара МакКонки для выделения и подтверждения различных микроорганизмов. Среда облегчает и ускоряет идентификацию некоторых грамотрицательных и грамположительных бактерий по контрастному цвету колоний, который формируется в результате расщепления двух хромогенных субстратов ферментами, специфичными для определённых родов или видов.

При изготовлении среды пептоны животного или растительного происхождения полностью заменены химически определёнными пептонами. Это позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE), трансмиссивной губчатой энцефалопатией (TSE) и генетически модифицированными организмами (ГМО), характерные для пептонов животного и растительного происхождения.

Ферменты, вырабатываемые видами Enterococcus, Escherichia coli и колиформными бактериями, расщепляют хромогенные субстраты, включённые в состав среды:

• фермент β-глюкозидаза у энтерококков расщепляет один из хромогенных субстратов с образованием синих колоний;
• Escherichia coli образует пурпурно-малиновые колонии благодаря ферменту β-D-галактозидазе, расщепляющему второй хромогенный субстрат;
• колиформные бактерии образуют пурпурные колонии вследствие расщепления обоих хромогенных субстратов;
• наличие в пептоне и триптоне значительного количества фенилаланина и триптофана позволяет выявлять активность триптофандезаминазы с помощью реагента TDA (R036); виды Proteus, Morganella и Providencia при этом приобретают коричневую окраску.

Дополнительное подтверждение Escherichia coli выполняют с помощью индольной пробы с реагентом DMACA (R035). Реакцию следует проводить на фильтровальной бумаге.

Некоторые штаммы Enterobacter cloacae, не имеющие β-глюкозидазы, образуют розовые колонии, неотличимые от колоний Escherichia coli. Реагент DMACA для индольной пробы позволяет различать Escherichia coli и Enterobacter, а также Proteus mirabilis и другие виды.

Пептоны HiCynth™ № 2 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, а также другими необходимыми питательными веществами для роста микроорганизмов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 55,44 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения и полностью растворите среду.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при стерилизации — 15 фунтов-силы на квадратный дюйм, ориентировочно 0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.
• Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Поскольку реакция основана на взаимодействии фермента с субстратом, интенсивность окраски может изменяться в зависимости от изолята.
2. Некоторые виды могут демонстрировать различающиеся варианты роста из-за различий в пищевых потребностях.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,54 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• Конечный pH: 7,2 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранить порошок в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Приготовленную среду хранить при температуре 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывать флакон и хранить продукт в сухом состоянии.
• Из-за гигроскопичности порошка ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при приготовлении и применении среды в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного