HiMedia MCD1417-100G Основа HiCrome Listeria HiCynth агара

Основа селективной дифференциальной среды HiMedia MCD1417-100G HiCrome Listeria HiCynth агар для экспресс-идентификации видов Listeria. Применяется для прямого выделения листерий из пищевых продуктов; позволяет провести предварительную идентификацию Listeria monocytogenes в течение 24–48 часов после предварительного обогащения.

Принцип измерения

Среда основана на модификации методов Notermans et al. и Mengaud et al. Идентификация базируется на специфическом хромогенном определении активности β-глюкозидазы и ферментации рамнозы. Виды Listeria гидролизуют очищенный хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии синего цвета.

В данной модификации (HiCynth™) животные и растительные пептоны заменены химически определенными пептонами для исклю exclusions рисков BSE/TSE/ГМО. Поскольку активность β-глюкозидазы специфична для рода Listeria, другие микроорганизмы не могут использовать хромогенный субстрат и образуют белые колонии. Дифференциация видов внутри рода основана на способности ферментировать рамнозу:

• L. monocytogenes и L. innocua: синие колонии с желтым ореолом (рамноза-положительные).
• L. ivanovii: синие колонии без желтого ореола (рамноза-отрицательные).

Функции компонентов:

• Пептоны HiCynth™ №2 и №5: источники азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов комплекса B и других питательных веществ.
• Рамноза: ферментируемый углевод.
• Феноловый красный: индикатор ферментации.
• Хлорид натрия: поддержание осмотического равновесия.
• Хлорид лития и селективная добавка CA (FD181): подавление роста большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесеней.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,62 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки CA (FD181).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Тип образца: пищевые продукты.
• Сбор и обработка: согласно установленным руководствам по сбору проб пищевых продуктов.
• Инкубация: 24–48 часов при температуре 35–37 °C.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,3 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,3 $\pm$ 0,2 (водный раствор 6,72 % масс./об. при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением селективной добавки CA (FD181) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Состав (г/л)

Ограничения и предостережения

1. Различные штаммы одного вида могут проявлять разную интенсивность роста и окраски.
2. Интенсивность цвета зависит от активности ферментов конкретного изолята.
3. Для окончательного подтверждения вида необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
4. Каждая партия протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта следует избегать попадания влаги для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные среды и контаминированные материалы подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.

Комплект поставки

• Основа среды HiCrome Listeria HiCynth агар: 100 г.