Селективная и дифференциальная питательная среда HiMedia MCD1417-100G Основа HiCrome Listeria HiCynth агара производства HiMedia предназначена для быстрого прямого выявления и предварительной идентификации видов Listeria. Основа применяется для анализа пищевых образцов, обеспечивает рост Listeria и дифференциацию видов по β-глюкозидазной активности и ферментации рамнозы в течение 24–48 ч после предварительного обогащения.

Назначение

Основа HiCrome Listeria HiCynth агара предназначена для приготовления селективной и дифференциальной агаровой среды для быстрого и прямого выявления видов Listeria в пищевых образцах.

Состав

Формула на 1 л среды:

— химически определённые пептоны.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,62 г сухой основы в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое 1 флакона селективной добавки для Listeria CA Selective Supplement (FD181).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа HiCrome® Listeria Agar Base, Modified представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной для выявления видов Listeria в пищевых продуктах. Среда обеспечивает рост видов Listeria и предварительную идентификацию Listeria monocytogenes в течение 24–48 ч после предварительного обогащения.

Принцип основан на специфическом хромогенном выявлении активности β-глюкозидазы и ферментации рамнозы. Виды Listeria гидролизуют очищенный хромогенный субстрат, содержащийся в среде, с образованием колоний синего цвета.

В основе HiCrome® Listeria HiCynth™ Agar Base, Modified животные и растительные пептоны заменены химически определёнными пептонами. Это позволяет избежать рисков BSE/TSE/GMO, связанных с использованием пептонов животного происхождения.

Активность β-глюкозидазы специфична для видов Listeria: другие микроорганизмы не используют хромогенный субстрат и формируют белые колонии. Дифференциация видов Listeria основана на способности ферментировать рамнозу:

• колонии L. monocytogenes и L. innocua имеют синюю окраску с жёлтым ореолом или жёлтым фоном и дают положительную реакцию на ферментацию рамнозы;
• колонии L. ivanovii имеют синюю окраску без жёлтого ореола и дают отрицательную реакцию на ферментацию рамнозы.

Пептоны HiCynth™ № 2 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами для роста. Рамноза является сбраживаемым углеводом, феноловый красный — индикатором. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Хлорид лития и селективная добавка CA Selective Supplement (FD181) подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесневых грибов.

Тип образца

Тип образца: пищевые продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Руководства по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на этой среде.
2. Поскольку реакция основана на взаимодействии фермента и субстрата, интенсивность окраски может различаться у разных изолятов.
3. Для подтверждения результата необходимо провести дополнительные биохимические тесты.
4. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователям рекомендуется валидировать среду для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, с учётом индивидуальных требований к анализу.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется гель красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 6,72 % при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют при добавлении селективной добавки CA Selective Supplement (FD181) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 15–25 °C.
• Условия хранения сухой основы: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстрем