Питательная агаризованная среда HiMedia MCD1300-100G HiCrome колиформный HiCynth агар с SLS производства HiMedia с химически определённым составом предназначена для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий. Среда применяется для анализа проб воды и пищевых продуктов; рабочий диапазон pH приготовленной среды составляет 6,60–7,00.

Назначение

Среда рекомендована для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов.

• Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: химически определённые пептоны HiCynth™
• Тип упаковки: HDPE

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

— Химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiCrome® Coliform HiCynth™ Agar с SLS представляет собой селективную среду для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды и пищевых продуктов.

Животные пептоны полностью заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков BSE/TSE/GMO, связанных с использованием пептонов животного происхождения.

Пептон HiCynth™ № 3 и пируват натрия обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами. Фосфаты выполняют функцию буферной системы. Состав среды обеспечивает быстрое восстановление и размножение даже сублетально повреждённых колиформных бактерий. Лаурилсульфат натрия подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата:

• β-галактозидаза, продуцируемая колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов, вследствие чего колонии колиформных бактерий приобретают лососево-красную окраску;
• β-глюкуронидаза, продуцируемая E. coli, расщепляет X-глюкуронид; вследствие расщепления обоих хромогенов колонии E. coli окрашиваются от тёмно-синего до фиолетового цвета.

Добавление L-триптофана улучшает реакцию на индол и повышает надёжность выявления в сочетании с двумя хромогенными субстратами.

Для подтверждения E. coli на колонию тёмно-синего или фиолетового цвета наносят каплю реактива Ковача R008. Образование вишнёво-красной окраски указывает на положительную реакцию.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Если ожидается большое количество сопутствующих грамположительных бактерий, до автоклавирования добавьте новобиоцин в концентрации 5 мг/л.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 2,7 % при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды Shigella и Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
3. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований исследования.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, вентилируемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами. Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка эффективности

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при использовании продукта до окончания срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Комплект поставки

• Сухая питательная агаризованная среда HiMedia MCD1300-100G, 100 г, во флаконе из HDPE.