HiMedia MCD130-500G Rogosa SL HiCynth агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MCD130-500G Rogosa SL HiCynth агар производства HiMedia с химически определёнными пептонами. Среда предназначена для селективного культивирования лактобацилл, при этом высокая концентрация ацетата натрия и кислый pH подавляют сопутствующую микрофлору.

Назначение

Среда рекомендована для селективного культивирования лактобацилл. Применяется для выделения, количественного определения и идентификации лактобацилл из пищевых продуктов и образцов.

Тип образца: пищевые продукты.

Соль в составе делает среду непригодной для выделения молочнокислых лактобацилл, включая L. lactis, L. bulgaricus и L. helveticus.

Состав

Состав на 1 л:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

* Химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация

Агар Rogosa SL HiCynth™, также известный как агар RMW, представляет собой модификацию среды, разработанной Rogosa, Mitchell и Wiseman.

Селективность среды обеспечивается низким значением pH и высокой концентрацией ацетата натрия, подавляющими сопутствующую бактериальную флору.

Агар Rogosa SL HiCynth™ получают заменой пептонов животного и растительного происхождения на химически определённые пептоны для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Функции компонентов:

• Пептоны HiCynth™ № 4 и № 5 обеспечивают азотистые соединения, серу, микроэлементы и витамины группы B, необходимые для роста лактобацилл.
• Декстроза, арабиноза и сахароза являются ферментируемыми углеводами.
• Полисорбат 80 служит источником жирных кислот.
• Цитрат аммония и ацетат натрия подавляют плесневые грибы, стрептококки и многие другие микроорганизмы.
• Дигидрофосфат калия обеспечивает буферную способность среды.
• Сульфат магния, сульфат марганца и сульфат железа являются источниками неорганических ионов.
• Низкий pH среды и добавление уксусной кислоты обеспечивают селективность в отношении лактобацилл и подавляют другую бактериальную флору.

Высокая концентрация ацетата и кислый pH подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий. Перед дальнейшей идентификацией все колонии необходимо проверить окрашиванием по Граму и каталазным тестом.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 74,72 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Добавьте 1,32 мл ледяной уксусной кислоты.
4. Тщательно перемешайте и разлейте среду в культуральные пробирки или колбы.
5. Нагрейте до 90–100 °C в течение 2–3 мин.
6. Охладите до 45–50 °C для непосредственного посева.
7. Не автоклавируйте приготовленную среду.

Условия инкубации

Рекомендуемый режим инкубации посевов:

• 30 °C в течение 5 суток; или
• 37 °C в течение 3 суток;
• атмосфера: 95 % водорода и 5 % углекислого газа (CO₂).

Если обеспечить указанную атмосферу невозможно, инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара перед инкубацией.

После инкубации все колонии необходимо проверить окрашиванием по Граму и каталазным тестом перед дальнейшей идентификацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдали в присутствии 5 % углекислого газа (CO₂) и 95 % водорода (H₂) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г
• Конечный pH: 5,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,20–5,60
• Температура хранения: 2–8 °C
• Условия хранения: сухое проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения

Контроль качества

Внешний вид

Однородные мягкие комки кремового или жёлтого цвета, легко разрушающиеся до порошкообразного состояния.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 7,5 % масс./об. водного раствора с 0,132 % об./об. уксусной кислотой при 25 °C.

pH: 5,4 ± 0,2.

Значение pH

pH: 5,20–5,60.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте соответствующие методики обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Рекомендуется инкубировать чашки при 30 °C в течение 5 суток или при 37 °C в течение 3 суток в атмосфере, содержащей 95 % водорода и 5 % углекислого газа (CO₂). Если это невозможно, инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара перед инкубацией.
2. Высокая концентрация ацетата и кислый pH подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.
3. Перед дальнейшей идентификацией все кол