HiMedia MCD130-500G Rogosa SL HiCynth агар

Селективная сухая питательная среда HiMedia MCD130-500G Rogosa SL HiCynth агар для культивирования лактобацилл. Применяется для изоляции, подсчёта и идентификации Lactobacilli из пищевых продуктов и других образцов; содержит химически определенные пептоны HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Rogosa SL HiCynth™ агар (также известная как агар RMW) представляет собой модификацию среды, разработанной Рогозой, Митчеллом и Вайзманом. Селективность среды в отношении лактобацилл обеспечивается низким значением pH и высокой концентрацией ацетата натрия, что подавляет рост сопутствующей бактериальной флоры.

Основные компоненты и их функции:

• Химически определенные пептоны HiCynth™ № 4 и № 5: источники азотистых соединений, серы, микроэлементов и витаминов группы B, необходимых для роста лактобацилл.
• Декстроза (глюкоза), арабиноза и сахароза: ферментируемые углеводы.
• Полисорбат 80 (Tween 80): источник жирных кислот.
• Цитрат аммония и ацетат натрия: ингибиторы плесневых грибов, стрептококков и многих других микроорганизмов.
• Дигидрофосфат калия: обеспечивает буферную емкость.
• Сульфаты магния, марганца и железа: источники неорганических ионов.
• Уксусная кислота: в сочетании с низким pH среды подавляет рост посторонней бактериальной флоры.

Ограничения: из-за содержания солей среда не подходит для изоляции молочных лактобацилл, таких как L. lactis, L. bulgaricus и L. helveticus.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 74,72 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Добавьте 1,32 мл ледяной уксусной кислоты.
4. Тщательно перемешайте, разлейте по культуральным пробиркам или колбам.
5. Прогрейте при температуре 90–100 °C в течение 2–3 минут.
6. Охладите до 45–50 °C для прямого инокулирования. ВНИМАНИЕ: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.

Инкубация и анализ

Рекомендуется инкубировать чашки при температуре 30 °C в течение 5 суток или при 37 °C в течение 3 суток в атмосфере, содержащей 95 % водорода ($\text{H}_2$) и 5 % диоксида углерода ($\text{CO}_2$).

Если создание такой атмосферы невозможно, перед инкубацией инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара. Перед дальнейшей идентификацией все колонии необходимо проверить методом окрашивания по Грамму и каталазным тестом.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородные мягкие комки от кремового до желтого цвета, легко рассыпающиеся в порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность: светло-желтый опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 5,4 ± 0,2 (для 7,5 % водного раствора с добавлением 0,132 % уксусной кислоты при 25 °C).
• Диапазон pH: 5,20–5,60.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов в присутствии 5 % $\text{CO}_2$ и 95 % $\text{H}_2$.

Область применения и работа с образцами

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов. При сборе и подготовке образцов следует руководствоваться установленными методическими указаниями.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 2–8 °C (как для сухой, так и для приготовленной среды).
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков.
• Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации (сжиганию) в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.