HiMedia MCD1295-500G HiCrome E. coli HiCynth агар

Агар HiMedia MCD1295-500G HiCrome E. coli HiCynth агар производства HiMedia — сухая химически определённая питательная среда для микробиологического анализа. Применяется для обнаружения и количественного определения Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктах без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или реактивом индола; отдельные штаммы Escherichia coli могут не проявлять β-глюкуронидазную активность.

Назначение

Среда рекомендована для обнаружения и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах, а также для выделения Escherichia coli из проб воды и пищевых продуктов.

Состав

Состав на 1000 мл:

• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiCrome® E. coli Agar создана на основе триптон-желчного агара для обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных бактерий по наличию фермента β-глюкуронидазы, высокоспецифичного для E. coli.

Хромогенный компонент X-глюкуронид используется для выявления активности β-глюкуронидазы E. coli. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, после чего внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвободившийся хромофор придаёт колониям E. coli голубовато-зелёную окраску.

Пептоны HiCynth™ № 2 и HiCynth™ № 5 обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, азотсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Синтетическое моющее вещество № 1 подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают буферное действие.

HiCrome® E. coli HiCynth™ Agar приготовлена с полной заменой пептонов животного и растительного происхождения на пептоны с химически определённым составом для исключения рисков BSE/TSE, связанных с пептонами животного происхождения.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Поверхность разлитой среды перед использованием высушивают.

Методика подготовки и анализа проб

1. Пищевые образцы разбавьте в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой M028 с массовой концентрацией 0,1 %.
2. Гомогенизируйте образец в блендере или лабораторном гомогенизаторе типа «стомacher».
3. Нанесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированной пищевой пробы на поверхность чашки.
4. Распределите пробу стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
6. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.
7. Интерпретируйте результаты по росту микроорганизмов и окраске колоний.

Типы образцов

• Пробы воды.
• Пищевые продукты.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными стандартами.

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательный результат по этому признаку.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
3. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,66 % (масс./об.) при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• Расчётный pH: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытого флакона: 15–25 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.
• Хранение после вскрытия: после каждого использования плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Причина требования к сухому хранению: гигроскопичность порошка; нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При обращении с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами