HiMedia MCD1295-500G HiCrome E. coli HiCynth агар

Хромогенный агар HiMedia MCD1295-500G HiCrome E. coli HiCynth для селективного выделения и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах и воде. Среда позволяет идентифицировать кишечную палочку без проведения дополнительных подтверждающих тестов на мембранных фильтрах или с использованием индольного реагента.

Принцип измерения

В основе HiCrome® E. coli Agar лежит модификация тройного сахарного желчного агара (Tryptone Bile Agar). Дифференциация E. coli от других колиформ осуществляется по наличию фермента глюкуронидазы, который обладает высокой специфичностью для данного вида.

В состав среды входит хромогенный агент X-глюкуронид. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, и внутриклеточный фермент глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобожденный хромофор придает колониям E. coli характерный сине-зеленый цвет.

Для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивных спонгиформных энцефалопатий), связанные с использованием компонентов животного происхождения, в данной версии (HiCynth™) все пептоны заменены на химически определенные.

Функции компонентов:

• Химически определенные пептоны HiCynth™ № 2 и № 5: обеспечивают организм углеродом, азотистыми соединениями, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Синтетический детергент № 1: подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия и фосфаты: поддерживают осмотический баланс и обеспечивают буферное действие.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Поверхность посевных сред перед использованием должна быть высушена.
2. Пищевые образцы разводят в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой 0,1 % (масса/объем) |M028| и гомогенизируют в блендере или стомачере.
3. На чашку с агаром вносят 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца и распределяют стерильным стеклянным шпателем.

Инкубация и интерпретация

1. Пластины инкубируют при температуре 30 °C в течение 4 часов.
2. Затем переносят в термостат при температуре 44 °C на 18 часов.
3. Результат: колонии E. coli окрашиваются в сине-зеленый цвет.

Приготовление среды

1. Растворить 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 44 °C в течение 18–24 часов.

* — соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli; небольшое количество штаммов может быть отрицательным по этому признаку.
• Некоторые виды Salmonella могут быть $\beta$-глюкуронидаза-положительными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +15…+25 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.

Безопасность и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.