HiMedia MCD1295-100G HiCrome E. coli HiCynth агар

Хромогенный агар HiMedia MCD1295-100G HiCrome E. coli HiCynth для селективного выделения и подсчёта Escherichia coli в пищевых продуктах и воде. Среда позволяет идентифицировать кишечную палочку без дополнительного подтверждения на мембранных фильтрах или с помощью индельного реагента.

Область применения

Среда рекомендуется для обнаружения и количественного определения Escherichia coli в образцах воды и пищевых продуктах. Благодаря использованию химически определимых пептонов HiCynth™, продукт исключает риски, связанные с БКЭ/ТСЭ (губчатой энцефалопатией), которые характерны для сред на основе животных или растительных пептонов.

Принцип измерения и интерпретация

Основой среды является модифицированный триптон-желчный агар. Дифференциация E. coli от других колиформ осуществляется по наличию фермента $\beta$-глюкуронидазы, который высокоспецифичен для этого вида.

В состав среды входит хромогенный агент X-глюкуронид. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, и внутриклеточный фермент $\beta$-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобожденный хромофор окрашивает колонии E. coli в сине-зелёный цвет.

Функции компонентов:

• Пептоны HiCynth™ № 2 и № 5: обеспечивают организм углеродом, азотом, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими питательными веществами.
• Синтетическое моющее средство № 1: подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия и фосфаты: поддерживают осмотический баланс и обеспечивают буферное действие.

Методика проведения анализа

Подготовка образцов

1. Поверхность посевной среды перед использованием подсушивают.
2. Пищевые образцы разбавляют в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной пептонной водой 0,1 % (масс./об.) |M028| и гомогенизируют в блендере или стомачере.
3. На чашку Петри переносят 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца и распределяют стерильным стеклянным шпателем.

Инкубация

• Первичная инкубация: 30 °C в течение 4 часов.
• Вторичная инкубация: 44 °C в течение 18 часов.

Приготовление среды

1. Растворить 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-жёлтый, от прозрачного до слегка опалесцирующего гель.
• pH водного раствора (3,66 % масс./об. при 25 °C): 7,00–7,40.
• Вес: 100 г.
• Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™.
• Форма выпуска: порошок.
• Материал упаковки: ПНД (HDPE).
• Происхождение компонентов: химически определенные (HiCynth™).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 44 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения метода

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды Salmonella могут быть $\beta$-глюкуронидаза-положительными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.