HiMedia MCD1295-100G HiCrome E. coli HiCynth агар

Питательная агаровая среда HiMedia MCD1295-100G HiCrome E. coli HiCynth агар — сухой порошок для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах. Среда позволяет проводить анализ без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента, а колонии E. coli окрашиваются в голубовато-зелёный цвет.

Назначение

Среда предназначена для выделения, выявления и количественного определения Escherichia coli в пробах воды и пищевых продуктах без дальнейшего подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента.

Типы исследуемых образцов

• Пробы воды
• Пробы пищевых продуктов

Состав

* Химически определённые пептоны.

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® E. coli HiCynth агар основан на триптон-желчном агаре, предназначенном для обнаружения Escherichia coli в пищевых продуктах. Использование среды обеспечивает более быстрое, надёжное и точное восстановление E. coli.

Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных микроорганизмов по наличию фермента β-глюкуронидазы, характерного для E. coli. Хромогенный агент X-глюкуронид позволяет выявлять активность β-глюкуронидазы:

1. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид.
2. Внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом.
3. Высвободившийся хромофор придаёт колониям E. coli голубовато-зелёную окраску.

Среда предназначена для выделения E. coli из проб воды и пищевых продуктов. В составе HiCrome® E. coli HiCynth агара пептоны животного и растительного происхождения полностью заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков BSE/TSE, связанных с пептонами животного происхождения.

Пептоны HiCynth™ № 2 и HiCynth™ № 5 обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, соединениями азота, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Синтетическое моющее средство № 1 подавляет грамположительные микроорганизмы. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают буферное действие.

Методика приготовления и проведения анализа

1. Перед использованием высушите поверхность приготовленной питательной среды.
2. Разведите образцы пищевых продуктов в соотношении 1:5 или 1:10 с использованием стерильной 0,1 % (масса/объём) пептонной воды M028.
3. Гомогенизируйте образец в блендере или лабораторном гомогенизаторе типа «стомахер».
4. Нанесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированного образца пищевого продукта на поверхность чашки.
5. Распределите образец по поверхности стерильным стеклянным шпателем.
6. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
7. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.
8. Интерпретируйте результаты по росту микроорганизмов и окраске колоний согласно характеристикам культурального отклика.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; ориентировочное давление — ≈0,103 МПа (15 psi).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• Реакция: реакция 3,66 % (масса/объём) водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• pH по спецификации состава при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидазоположительными.
3. У некоторых видов может наблюдаться слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.

Отбор и обращение с образцами

• Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и локальным стандартам.
• Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытого контейнера: 15–25 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскоп