HiMedia MCD120-500G HiCynth агар для Pseudomonas (для флуоресцеина)

Сухая питательная среда HiMedia MCD120-500G HiCynth агар для Pseudomonas (для флуоресцеина) на основе химически определенного пептона. Применяется для выявления продукции флуоресцеина — водорастворимого, нерастворимого в хлороформе флуоресцентного пигмента, вырабатываемого видами Pseudomonas.

Принцип работы и интерпретация

Среда основана на формуле Кинга и др., модифицированной согласно Фармакопее США (USP), для детекции флуоресцеина. В данной модификации (HiCynth™) пептон животного происхождения заменен химически определенным пептоном для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии).

Среда стимулирует выработку флуоресцеина видами Pseudomonas и подавляет образование пиоцианина. Флуоресцентный пигмент диффундирует из колоний в агар, придавая ему желто-флуоресцентную окраску. Некоторые штаммы могут вырабатывать небольшое количество пиоцианина, что приводит к желто-зеленой окраске.

Роль компонентов:

• HiCynth™ Peptone No.3 и HiCynth™ Peptone No.5: обеспечивают необходимые азотистые и углеродные питательные вещества, аминокислоты, витамины и микроэлементы.
• Дигидрофосфат калия: буферизирует среду.
• Сульфат магния: обеспечивает катионы, необходимые для активации продукции флуоресцеина.

Особенности эксплуатации:

• Концентрация соли более 2 % отрицательно влияет на выработку пигмента.
• УФ-облучение может обладать бактерицидным действием; перед помещением культуры под УФ-свет необходимо убедиться в достаточном росте микроорганизмов.
• Температура является определяющим фактором: большинство флуоресцентных штаммов (кроме P. aeruginosa) не растут при 35 °C, их оптимальный рост наблюдается при 25–30 °C.
• Штаммы, продуцирующие пиоцианин, обычно также продуцируют флуоресцеин, поэтому их следует дифференцировать от простых флуоресцентных псевдомонад другими методами.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и стерилизации

1. Суспендируйте 38 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободный порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: в чашках Петри образуется желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 3,8 % (масса/объем) водного раствора (содержащего 1 % об/об глицерина) при 25 °C составляет 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 1 % глицерина после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Технические характеристики

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.