HiMedia MCD120-100G HiCynth агар для Pseudomonas (для флуоресцеина)

Сухая питательная агаризованная среда HiMedia MCD120-100G HiCynth агар для Pseudomonas (для флуоресцеина) представляет собой химически определённый порошок массой 100 г. Среда предназначена для выявления образования флуоресцеина бактериями рода Pseudomonas и усиливает продукцию флуоресцеина при одновременном подавлении образования пиоцианина.

Назначение

Среда применяется для обнаружения продукции флуоресцеина — водорастворимого и нерастворимого в хлороформе флуоресцентного пигмента — бактериями рода Pseudomonas. Формула основана на среде Pseudomonas Agar (для флуоресцеина), описанной King и соавторами и модифицированной в Фармакопее США.

Пептоны животного происхождения заменены химически определёнными пептонами HiCynth™ для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам. Пептоны являются химически определёнными.

* Химически определённые пептоны.

Принцип действия и интерпретация

Пептоны HiCynth™ № 3 и № 5 обеспечивают рост Pseudomonas, поставляя необходимые азотистые и углеродсодержащие питательные вещества, аминокислоты, витамины и микроэлементы.

Дикалий фосфат выполняет буферную функцию. Сульфат магния обеспечивает необходимые катионы для активации продукции флуоресцеина.

Среда усиливает образование флуоресцеина бактериями рода Pseudomonas и подавляет образование пиоцианина. Флуоресцентный пигмент диффундирует из колоний Pseudomonas в агар и вызывает жёлтую флуоресценцию.

Некоторые штаммы Pseudomonas образуют небольшое количество пиоцианина, что приводит к появлению жёлто-зелёной окраски. Штамм Pseudomonas, продуцирующий пиоцианин, обычно также образует флуоресцеин, поэтому его необходимо отличать от других флуоресцирующих псевдомонад дополнительными методами.

Концентрация солей более 2 % влияет на образование пигмента. Ультрафиолетовое освещение может обладать бактерицидным действием, поэтому перед помещением культуры под ультрафиолетовый источник необходимо убедиться в наличии хорошего роста.

Температура может быть определяющим фактором: большинство других флуоресцирующих штаммов не растёт при 35 °C и развивается при 25–30 °C.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа, ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция: 3,8%-ный водный раствор среды с добавлением 1 % глицерина по объёму при 25 °C.

pH: 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавлением 1 % глицерина при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Указанный температурный диапазон хранения: 10–30 °C.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Техническое отличие формулы

В HiCynth™ агаре для флуоресцеина пептоны животного происхождения заменены химически определёнными пептонами HiCynth™ № 3 и № 5; формула сохраняет назначение среды Pseudomonas Agar для выявления флуоресцеина и дополнительно предназначена для снижения рисков, связанных с компонентами животного происхождения.