HiMedia MCD118-500G Основа HiCynth агара с маннитом и солью

Сухая селективная питательная среда HiMedia MCD118-500G Основа HiCynth агара с маннитом и солью производства HiMedia предназначена для выделения патогенных стафилококков и содержит химически определённые пептоны HiCynth™. Основа применяется для анализа пищевых и молочных образцов, а высокая концентрация хлорида натрия подавляет рост бактерий, отличных от стафилококков.

Назначение

HiMedia MCD118-500G рекомендуется использовать как селективную среду для выделения патогенных стафилококков из пищевых и молочных образцов, а также других исследуемых материалов.

Состав

Состав на 1 л среды:

* Химически определённые пептоны.
** Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Технические характеристики состава

Принцип действия и интерпретация результатов

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является хорошо изученным условно-патогенным микроорганизмом человека.

Способность свёртывать плазму остаётся наиболее распространённым и общепринятым критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Стафилококки обладают характерной способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Выделение коагулазоположительных стафилококков на агаре с маннитом и феноловым красным, содержащем 7,5 % хлорида натрия, основано на селективном действии соли.

Основа агара с маннитом и солью HiCynth™ изготовлена с использованием химически определённых пептонов, не содержащих пептонов животного и растительного происхождения, для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Среда рекомендуется для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов.

Дополнительное выявление липазной активности Staphylococcus aureus выполняют после внесения эмульсии яичного желтка FD045. Липазная активность визуализируется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Пептоны HiCynth™ № 1 и HiCynth™ № 5 обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия действует как ингибирующий агент для бактерий, отличных от стафилококков. Маннитол является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, которая выявляется индикатором феноловым красным.

S. aureus ферментирует маннитол и образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазонегативные штаммы S. aureus, как правило, не ферментируют маннитол и поэтому образуют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить постановкой коагулазного теста пробирочным или предметно-стекольным методом. Возможный S. aureus должен быть подтверждён коагулазным тестом.

Исследуемый микроорганизм также следует пересевать на менее ингибирующую среду, не содержащую избыточного количества соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования. В качестве такой среды может использоваться питательный бульон HiCynth™ (MCD002).

Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать задержанную ферментацию маннитола. Поэтому отрицательные результаты следует инкубировать дополнительно 24 ч перед окончательной отбраковкой.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте 5 % об./об. эмульсии яичного желтка FD045.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Среда содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном воздействии воздуха и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки, поэтому порошок необходимо хранить в плотно закрытой ёмкости в сухом месте, защищённом от яркого света.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 11,1 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ограничения метода

• Возможный S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом.
• Исследуемый микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избыточного содержания соли, чтобы избежать возможного влияния соли на коагулазный тест и другие диагностические исследования, например при использовании питательного бульона HiCynth™ (MCD002).
• Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать задержанную ферментацию маннитола. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать в течение дополнительных