HiMedia MCD1145-500G Основа HiCynth среды Листерия Оксфорд

Основа сухой питательной среды HiMedia MCD1145-500G Основа HiCynth среды Листерия Оксфорд для изоляции видов Listeria из различных образцов. Применяется для анализа пищевых и молочных продуктов, а также клинических проб; содержит химически определенный пептон HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Кертиса и др. для выделения L. monocytogenes. Химически определенный пептон HiCynth™ No.1 служит источником углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ. Кукурузный крахмал нейтрализует образующиеся токсичные метаболиты. Хлорид лития и антибиотики (добавляемые в виде селективных добавок) подавляют рост грамотрицательных бактерий и большинства грамположительных организмов.

L. monocytogenes гидролизует эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с ионами железа, что приводит к образованию черных зон вокруг колоний.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 27,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки Oxford (FD071) или 1 флакона селективной добавки CM (FD126).
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

• Для фекальных и биологических образцов: образец гомогенизируют в 0,1% пептонной воде (M028). 0,1 мл пробы либо напрямую высевают на селективную среду для Listeria, либо инокулируют в селективный бульон и инкубируют при 30 °C в течение 7 дней с последующим пересевом на селективную среду.
• Для пищевых и молочных продуктов: 25 мл или 25 г образца добавляют к 225 мл обогатительного бульона для Listeria UVM (M890A). После гомогенизации инкубируют 48 часов при 30 °C. Обогащенные культуры высевают на основу среды Листерия Оксфорд и инкубируют аэробно 48 часов при 37 °C.
• Подтверждение: 5 типичных колоний (эскулин-положительных) пересевают на триптон-соевый агар HiCynth™ (MCD290), инкубируют 24 часа и проводят биохимическую идентификацию.

Технические характеристики

Физико-химические показатели

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-желтого до темно-желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: темно-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком.
• Реакция (pH 5,55% р-ра при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективных добавок Oxford (FD071) или CM (FD126) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для выделения Listeria из пищевых, молочных и клинических образцов.

Ограничения:

• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.
• Каждая партия протестирована на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA); для специфических требований пользователя рекомендуется провести собственную валидацию.
• Для окончательной идентификации изолированных организмов требуются дополнительные биохимические тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Все загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.