HiMedia MCD1041-100G HiCynth агар для теста на ДНКазу с толуидиновым синим

Питательная агаровая среда HiMedia MCD1041-100G HiCynth агар для теста на ДНКазу с толуидиновым синим производства HiMedia содержит химически определённые пептоны и предназначена для выявления активности дезоксирибонуклеазы. Среда применяется для анализа бактерий и грибов, особенно для идентификации патогенных стафилококков, при этом толуидиновый синий может ингибировать некоторые штаммы стафилококков и требует подтверждения дополнительными тестами.

Назначение и область применения

HiCynth агар с толуидиновым синим применяют для:

• выявления активности дезоксирибонуклеазы бактерий и грибов;
• идентификации патогенных стафилококков;
• дифференциации и идентификации непигментированных видов Serratia, выделенных из клинического материала и способных быть ошибочно идентифицированными как представители родов Enterobacter и Klebsiella.

Масса упаковки составляет 100 г.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

* Пептоны с химически определённым составом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 42,1 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Среда предназначена для обнаружения дезоксирибонуклеазной активности бактерий и грибов, в особенности для идентификации патогенных стафилококков.

Активность ДНКазы проявляется в деполимеризации ДНК. В результате вокруг микробного роста образуется прозрачная зона, которую можно визуализировать заливкой поверхности чашки соляной кислотой.

При добавлении толуидинового синего непосредственно в состав среды активность ДНКазы вызывает ярко-розовую реакцию благодаря метахроматическим свойствам толуидинового синего. Положительная реакция характеризуется появлением розовой или красной зоны вокруг роста микроорганизмов.

Добавление толуидинового синего позволяет дифференцировать и идентифицировать непигментированные виды Serratia, выделенные из клинических источников. Это особенно важно для предотвращения ошибочной идентификации таких микроорганизмов как представителей родов Enterobacter и Klebsiella.

Активность ДНКазы была обнаружена Векманом и Кэтлином у микроорганизмов рода Micrococcus; исследователи установили корреляцию между активностью ДНКазы и коагулазы, поскольку коагулазоположительные виды также были ДНКазоположительными. Ди Сальво подтвердил результаты Векмана и Кэтлина и наблюдал точную корреляцию активности ДНКазы и коагулазы. В его эксперименте для активации фермента ДНКазы в среду добавляли ДНК и хлорид кальция.

Шрайер модифицировал среду для определения ДНКазы добавлением толуидинового синего. Модифицированная среда обеспечила более быструю идентификацию Serratia marcescens и позволила дифференцировать Serratia от других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Среда HiCynth представляет собой модификацию исходной среды с использованием пептонов с химически определённым составом вместо пептонов животного происхождения, что позволяет избежать риска BSE/TSE.

Пептоны HiCynth No. 3 и HiCynth No. 5 обеспечивают микроорганизмы источниками азота, углеродными соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и необходимыми питательными веществами для роста.

Некоторые штаммы стафилококков могут подавляться толуидиновым синим на агаре для теста на ДНКазу HiCynth. Для идентификации таких микроорганизмов необходимо проводить дополнительные подтверждающие тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-синий однородный свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель синего цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакция 4,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия хранения и срок годности

• Хранить при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Указанный в карточке температурный диапазон: 10–30 °C.

Технические характеристики

Ограничения применения

Толуидиновый синий может ингибировать некоторые штаммы стафилококков. Отрицательный результат или отсутствие характерной реакции при исследовании стафилококков следует подтверждать дополнительными тестами.