HiMedia MCD089-500G Основа HiCynth кровяного агара с низким pH

Основа питательной среды HiMedia MCD089-500G Основа HiCynth кровяного агара с низким pH содержит химически определённый пептон и имеет конечный pH 6,8±0,2. Применяется после добавления крови для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и стрептококки, а также может использоваться как универсальная среда без крови.

Назначение

Основа HiCynth кровяного агара с низким pH предназначена для приготовления кровяного агара после добавления стерильной дефибринированной крови. Среда рекомендована для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria, стрептококки и другие виды.

Типы клинических образцов: фекалии, моча, мокрота и другие клинические материалы.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности. Пептон является химически определённым.

Принцип действия и интерпретация

Основа кровяного агара HiCynth™ представляет собой питательную базовую среду для приготовления кровяного агара путём добавления крови. Животные пептоны полностью заменены химически определёнными пептонами, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерные для животных пептонов.

Среда может использоваться как универсальная питательная среда без добавления крови. В этом случае pH следует скорректировать до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растёт в слабощелочной среде.

Низкий pH основы кровяного агара — pH 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию чёткой зоны гемолиза. Такая реакция среды также благоприятна для культивирования стрептококков и пневмококков.

Среда на основе кровяного агара может применяться:

• с добавлением фенолфталеинфосфата — для обнаружения стафилококков, продуцирующих фосфат;
• с добавлением соли и агара — для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней;
• для определения диапазона солёности, пригодного для роста морских Flavobacteria;
• для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Пептон HiCynth™ № 3 обеспечивает среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Характер гемолиза зависит от вида использованной крови. Овечья кровь даёт наилучшие результаты при культивировании стрептококков группы A. При этом овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов. При использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и имитируют Streptococcus pyogenes.

Техническое отличие состава: в основе используются химически определённые пептоны вместо пептонов животного происхождения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Подготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными лабораторными процедурами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление овечьей крови. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако образующийся гемолиз может имитировать β-гемолиз стрептококков; результат необходимо подтвердить.
3. Характер гемолиза зависит от источника использованной крови.
4. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,0%-ного водного раствора по массе при 25 °C:

• pH: 6,8±0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранение порошка: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчат