HiMedia MCD089-100G Основа HiCynth кровяного агара с низким pH

Основа HiCynth кровяного агара с низким pH HiMedia MCD089-100G на базе химически определенного пептона. Рекомендуется для изоляции и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, таких как Neisseria, Streptococci и др., после добавления крови.

Принцип измерения и интерпретация

Основа кровяного агара HiCynth™ с низким pH представляет собой высокопитательную среду, используемую в качестве базовой для приготовления кровяного агара путем добавления крови. В составе животные пептоны полностью заменены химически определенными пептонами для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии), связанных с использованием компонентов животного происхождения.

Среда может использоваться и без добавления крови в качестве среды общего назначения; в этом случае pH следует довести до 7,2–7,4, так как большинство бактерий лучше растут в слабощелочной среде. Низкий уровень pH основы (6,8) стабилизирует эритроциты и способствует формированию четкой зоны гемолиза. Данный показатель pH также благоприятен для культивирования стрептококков и пневмококков.

Особенности применения:

• При добавлении фосфата фенолфталеина среда используется для обнаружения стафилококков, продуцирующих фосфат.
• С добавлением соли и агара применяется для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней.
• Используется для определения диапазона солености морских Flavobacteria.
• Применяется для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Роль компонентов:

• Пептон HiCynth™ №3: обеспечивает углерод, азот, аминокислоты и витамины.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс среды.
• Кровь: обогащает среду факторами роста, необходимыми для требовательных организмов, и позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Важно: Гемолитические реакции зависят от вида используемой крови. Кровь овцы обеспечивает наилучшие результаты для стрептококков группы А, однако не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus из-за дефицита пиридин-нуклеотидов. При использовании конской крови колонии H. haemolyticus вызывают гемолиз, имитируя Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Назначение: Основа питательной среды
• Вес: 100 г
• Физическая форма: Порошок от кремового до желтого цвета, однородный, свободно текущий
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: Химически определенные (HiCynth™)
• Реакция 4 % водного раствора (при 25 °C): pH 6,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Желирование: Плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Цвет и прозрачность основы: Светло-янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Цвет после добавления 5–7 % крови: Вишнево-красный непрозрачный гель

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и работа с образцами

Типы образцов: клинический материал (фекалии, моча, мокрота и др.). Сбор и обработка: при работе с клиническими образцами следует соблюдать установленные инструкции по обращению с биоматериалом. После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения и предостережения

• Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавлять кровь овцы. Среда в таком составе не поддерживает рост H. haemolyticus.
• Добавление конской или кроличьей крови поддерживает рост H. haemolyticus, но их колонии напоминают $\beta$-гемолитические стрептококки, что требует дополнительного подтверждения.
• Характер гемолиза варьируется в зависимости от источника крови.
• Различные организмы имеют разные требования к росту и могут демонстрировать вариативность на данной среде.

Меры предосторожности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Утилизация: автоклавирование и/или сжигание согласно лабораторным протоколам по обращению с инфекционными материалами.