HiMedia MCD089-100G Основа HiCynth кровяного агара с низким pH

Питательная среда HiMedia MCD089-100G Основа HiCynth кровяного агара с низким pH — химически определённая порошкообразная основа с конечным pH 6,8 ± 0,2. Предназначена для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и стрептококки, после добавления крови; среда с овечьей кровью не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.

Назначение и область применения

Основа HiCynth кровяного агара с низким pH применяется для приготовления кровяного агара путём добавления стерильной дефибринированной крови. Среда рекомендована для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria, стрептококки и другие виды.

Клинический материал для посева:

• фекалии;
• моча;
• мокрота;
• другие клинические образцы.

Среда также может использоваться без добавления крови как универсальная питательная среда. При применении без крови pH необходимо довести до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растёт в слабощелочной среде.

Состав

Дозировка указана на 1 л среды.

• Пептон с химически определённым составом.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Основа кровяного агара HiCynth™ с низким pH представляет собой высокопитательную базовую среду для приготовления кровяного агара с добавлением крови.

Животные пептоны полностью заменены пептонами с химически определённым составом, что исключает риски BSE/TSE, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

Низкий pH основы кровяного агара — pH 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию прозрачной зоны гемолиза. Такой pH также благоприятен для культивирования стрептококков и пневмококков.

Кровяной агар на основе среды может использоваться:

• с добавлением фосфата фенолфталеина для выявления стафилококков, продуцирующих фосфат;
• с добавлением соли и агара для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней;
• для определения диапазона солёности, пригодного для роста морских флавобактерий;
• для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Функции компонентов:

• пептон HiCynth™ № 3 обеспечивает среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам;
• кровь позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Гемолитические реакции зависят от вида используемой животной крови. Овечья кровь обеспечивает наилучшие результаты для стрептококков группы A. При этом овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов. При использовании конской крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и имитируют Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,00 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 4,0%-ного раствора в воде при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление конской или кроличьей крови к базовой среде поддерживает рост H. haemolyticus, однако формируемая картина напоминает β-гемолитические стрептококки и требует подтверждения.
3. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.
4. Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на среде.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Оценка эффективности

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Техническое отличие от стандартных основ кровяного агара

В основе HiCynth™ животные пептоны полностью заменены пептонами с химически определённым составом; низкий pH 6,8 стабилизирует эритроциты и способствует визуализации зон гемолиза после добавления крови.