HiMedia MCD078-500G Железный HiCynth агар Клиглера

Питательная агаровая среда HiMedia MCD078-500G «Железный HiCynth агар Клиглера» производства HiMedia с химически определённым пептоном. Среда предназначена для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации декстрозы, лактозы и образованию H₂S, при массе упаковки 500 г.

Назначение

Среда предназначена для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных палочек в различных образцах по ферментации декстрозы, лактозы и образованию сероводорода (H₂S).

Тип образца: выделенные микроорганизмы из пищевых продуктов, молочных продуктов и воды.

Чистые культуры предполагаемых микроорганизмов, выделенные на селективно-дифференциальных средах, включая агар МакКонки HiCynth (MCD081), висмут-сульфитный агар HiCynth (MCD027), дезоксихолат-цитратный агар HiCynth (MCD065), SS-агар HiCynth (MCD108) и другие, пересевают на железный HiCynth агар Клиглера для идентификации.

Состав

Состав на 1 л среды:

* Пептон с химически определённым составом.

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Железный HiCynth агар Клиглера приготовлен с полной заменой пептонов животного и растительного происхождения на пептоны с химически определённым составом, что исключает риски BSE/TSE, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

Железный агар Клиглера представляет собой комбинацию свинцово-ацетатной среды Клиглера и двухсахарного агара Рассела. Среда используется как дифференциальная для тифозных, дизентерийных и родственных кишечных палочек. Феноловый красный применён вместо ранее использовавшегося индикатора Андраде.

Среда позволяет:

• отличать ферментирующие лактозу микроорганизмы от неферментирующих;
• дифференцировать Salmonella Typhi от других представителей рода Salmonella;
• дифференцировать Salmonella Paratyphi A от Salmonella Schottmuelleri и Salmonella Enteritidis;
• выявлять образование газа;
• выявлять образование сероводорода (H₂S).

Ферментация углеводов

Ферментация декстрозы вызывает образование кислоты, в результате чего индикатор изменяет цвет с красного на жёлтый. Поскольку декстроза присутствует в небольшом количестве, образование кислоты ограничено. На поверхности скошенной части среды в аэробных условиях происходит повторное окисление индикатора, поэтому поверхность сохраняет красный цвет.

При ферментации лактозы образуется большое количество кислоты, препятствующее повторному окислению индикатора; в результате вся среда окрашивается в жёлтый цвет.

Неферментирующие лактозу микроорганизмы, например Salmonella и Shigella, первоначально вызывают пожелтение скошенной части среды за счёт ферментации небольшого количества глюкозы (декстрозы). После исчерпания глюкозы в аэробной среде скошенной части реакция становится щелочной: скошенная часть окрашивается в красный цвет вследствие окисления образовавшихся кислот. В анаэробной среде столбика обратная реакция не происходит, поэтому столбик остаётся кислым и жёлтым.

Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, вызывают появление жёлтой окраски скошенной части и столбика. Большое количество образовавшихся кислот поддерживает кислый pH также в аэробных условиях.

Первоначальная окраска среды в пробирке свидетельствует об отсутствии ферментации как глюкозы (декстрозы), так и лактозы.

Образование газа и H₂S

Газообразование, или аэрогенная реакция, определяется по отдельным пузырькам, расслоению или смещению агара, а также по образованию трещин в столбике среды.

Комбинация сульфата железа и тиосульфата натрия обеспечивает выявление образования сероводорода. H₂S обнаруживается по чёрному окрашиванию столбика целиком либо по образованию чёрного кольца в верхней части столбика.

Пептон HiCynth™ № 1 является источником азота и углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ. Лактоза и декстроза обеспечивают дифференциацию видов кишечных палочек. Феноловый красный служит индикатором pH и изменяет окраску в ответ на образование кислоты при ферментации сахаров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и разлейте среду в пробирки.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки до 45–50 °C в наклонном положении, чтобы сформировать скошенную часть с основанием длиной около 25,4 мм (1″).

Наилучшие реакции получают на свежеприготовленной среде. Не используйте пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками.

Не допускайте перегрева: перегрев может привести к образованию осадка в среде.

Технические характеристики

• Наименование: железный HiCynth агар Клиглера
• Артикул: MCD078-500G
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Масса: 500 г
• Происхождение пептона: химически определённый пептон HiCynth™
• Дифференцирующие субстраты: лактоза, декстроза (глюкоза)
• Индикатор pH: феноловый красный
• Компоненты для выявления H₂S: сульфат железа и тиосульфат натрия
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Концентрация для приготовления: 57,52 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C
• Время инкубации при контроле культуральных характеристик: 18–48 ч
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенного агара образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция 5,75%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.