HiMedia MCD078-500G Железный HiCynth агар Клиглера

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia MCD078-500G Железный HiCynth агар Клиглера для идентификации грамотрицательных энтеробактерий. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды на основе ферментации декстрозы, лактозы и продукции H₂S.

Принцип измерения и интерпретация

Железный HiCynth агар Клиглера представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца (по Клиглеру) и двухсахарного агара Рассела. Среда предназначена для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бактерий. В данной модификации животные и растительные пептоны полностью заменены химически определенными пептонами HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE.

Механизм дифференциации

• Ферментация сахаров: Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества декстрозы производство кислоты ограничено, что приводит к реокислению индикатора на поверхности (скос остается красным). При ферментации лактозы вырабатывается большое количество кислоты, что предотвращает реокисление, и вся среда (и скос, и столбик) становится жёлтой.
• Продукция сероводорода (H₂S): Комбинация сульфата железа и тиосульфата натрия позволяет обнаружить выделение H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или образования чёрного кольца у верхней части столбика.
• Реакция неферментаторов лактозы (например, Salmonella и Shigella): Первоначально образуется жёлтый скос за счет ферментации небольшого количества глюкозы. После исчерпания запаса глюкозы в аэробных условиях скоса происходит окисление кислот, и реакция возвращается к щелочной (красный скос). В анаэробных условиях столбика реверсии не происходит, поэтому он остается кислым (жёлтый столбик).

Компоненты среды

• HiCynth™ Peptone No.1: источник азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ.
• Лактоза и декстроза: позволяют дифференцировать виды энтеробактерий.
• Феноловый красный: индикатор pH.
• Сульфат железа и тиосульфат натрия: система обнаружения H₂S.

Технические характеристики

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки до 45–50 °C в наклонном положении для формирования скоса со столбиком высотой около 25 мм (1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, чтобы предотвратить выпадение осадка в среде. Не используйте пробирки или бутыли с завинчивающимися крышками.

Посев и анализ

Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю. На среду переносят чистые культуры подозреваемых организмов с таких сред, как агар МакКонки HiCynth™ (MCD081), бисмуфит-сульфитный агар HiCynth™ (MCD027), дезоксихолат-цитратный агар HiCynth™ (MCD065) или SS-агар HiCynth™ (MCD108).

Контроль качества и культуральные характеристики

Внешний вид и свойства

• Вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель в пробирках (скосы).
• Реакция: pH 7,20–7,60 (водный раствор 5,75 % в/в при 25 °C: 7,4 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

1. Результаты следует фиксировать через 18–24 часа инкубации; превышение этого срока может привести к ошибочным результатам.
2. Для инокуляции необходимо использовать только прямую проволочную петлю.
3. Для исключения ошибок следует использовать только чистые изоляты.
4. При работе с образцами соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.