HiMedia MCD078-100G Железный HiCynth агар Клиглера

Питательная дифференциальная среда HiMedia MCD078-100G Железный HiCynth агар Клиглера представляет собой сухой порошковый агар с химически определённым пептоном HiCynth™. Применяется для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации декстрозы, лактозы и образованию H₂S; результаты следует учитывать через 18–24 ч инкубации.

Назначение и область применения

Железный HiCynth™ агар Клиглера предназначен для дифференциальной идентификации грамотрицательных кишечных бацилл из различных образцов на основании ферментации декстрозы, лактозы и образования сероводорода (H₂S).

Тип образца: выделенные микроорганизмы из пищевых продуктов, молочных продуктов и воды.

Среда используется для дифференциации тифозных, дизентерийных и родственных бацилл, а также для различения ферментирующих и неферментирующих лактозу микроорганизмов. Чистые культуры предполагаемых микроорганизмов, выделенные на плотных средах, например на агаре HiCynth™ МакКонки (MCD081), висмут-сульфитном агаре HiCynth™ (MCD027), дезоксихолат-цитратном агаре HiCynth™ (MCD065) или SS-агаре HiCynth™ (MCD108), пересевают на железный HiCynth™ агар Клиглера для идентификации.

Состав

Состав на 1 л среды:

• Химически определённый пептон.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Железный HiCynth™ агар Клиглера приготовлен с полной заменой пептонов животного и растительного происхождения на химически определённые пептоны, чтобы исключить риски BSE/TSE, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

Агар Клиглера объединяет среду с ацетатом свинца, описанную Клиглером, и двухсахарный агар Рассела. Среда применяется для дифференциации тифозных, дизентерийных и родственных бацилл. Феноловый красный используется вместо индикатора Андраде, применявшегося ранее для определения pH.

Среда позволяет:

• отличать ферментирующие лактозу микроорганизмы от неферментирующих;
• дифференцировать Salmonella Typhi от других представителей рода Salmonella;
• дифференцировать Salmonella Paratyphi A от Salmonella Schottmuelleri и Salmonella Enteritidis.

Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты, вследствие чего индикатор меняет цвет с красного на жёлтый. Поскольку количество декстрозы в среде небольшое, образование кислоты ограничено; поэтому на поверхности среды происходит повторное окисление индикатора, и цвет поверхности остаётся красным.

При ферментации лактозы образуется значительное количество кислоты, препятствующее повторному окислению индикатора, поэтому вся среда становится жёлтой.

Пептон HiCynth™ № 1 обеспечивает среду источниками азота и углерода, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами для роста микроорганизмов. Лактоза и декстроза обеспечивают дифференциацию видов кишечных бацилл. Феноловый красный является индикатором pH и изменяет цвет в ответ на кислоту, образующуюся при ферментации сахаров.

Сочетание сульфата железа и тиосульфата натрия обеспечивает выявление образования сероводорода. Образование H₂S определяется по чёрному окрашиванию столбика среды или по появлению чёрного кольца в его верхней части.

Неферментирующие лактозу микроорганизмы, например Salmonella и Shigella, первоначально образуют жёлтый скос вследствие кислоты, образующейся при ферментации небольшого количества глюкозы (декстрозы). После исчерпания глюкозы (декстрозы) в аэробной среде скоса реакция становится щелочной: скос окрашивается в красный цвет вследствие окисления образовавшихся кислот.

В анаэробной среде столбика обратного изменения реакции не происходит, поэтому столбик остаётся кислым и жёлтым. Лактозоферментирующие микроорганизмы образуют жёлтые скосы и столбики вследствие ферментации лактозы. Большое количество образующейся кислоты поддерживает кислый pH в аэробных условиях.

Исходный цвет среды в пробирке указывает на отсутствие ферментации как глюкозы (декстрозы), так и лактозы.

Образование газа, или аэрогенная реакция, выявляют по отдельным пузырькам, а также по расслоению или смещению агара вследствие образования трещин в столбике среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки до 45–50 °C в наклонном положении, чтобы сформировать скошенную поверхность с основанием столбика около 25,4 мм (1″).

Наилучшие реакции получают на свежеприготовленной среде. Не используйте пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками.

Не допускайте перегрева: перегрев может привести к образованию осадка в среде.

Подготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

Для инокуляции следует использовать прямую инокуляционную петлю. Используйте чистые изоляты, чтобы избежать ошибочных результатов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Результаты следует регистрировать через 18–24 ч; более ранняя или поздняя оценка может привести к ошибочным результатам.
2. Для инокуляции следует использовать прямую инокуляционную петлю.
3. Для исключения ошибочных результатов необходимо использовать чистые изоляты.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MCD078-100G
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Тип упаковки: HDPE
• Происхождение основы: химически определённый пептон HiCynth™, лактоза
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• pH 5,75%-ного водного раствора при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в пробирках в виде скосов образуется красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция