HiMedia MCD078-100G Железный HiCynth агар Клиглера

Дифференциальная питательная среда HiMedia MCD078-100G Железный HiCynth агар Клиглера для идентификации грамотрицательных энтеробактерий. Применяется для определения способности микроорганизмов ферментировать декстрозу и лактозу, а также продуцировать H₂S; основана на использовании химически определенного пептона HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип измерения и интерпретация

Железный агар Клиглера (Kligler Iron Agar) представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца и двухсахарного агара Рассела. Среда используется для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл.

Механизм дифференциации

• Ферментация сахаров: Ферментация декстрозы приводит к образованию кислоты, что изменяет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества декстрозы продукция кислоты ограничена, что приводит к реокислению индикатора на поверхности среды (скос остается красным). При ферментации лактозы вырабатывается большое количество кислоты, что предотвращает реокисление, и вся среда (включая скос) становится жёлтой.
• Продукция сероводорода (H₂S): Комбинация сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить выделение H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания в столбике или в виде кольца у верхней части столбика.
• Реакции различных групп:
  • Неферментаторы лактозы (например, Salmonella и Shigella): Сначала образуют жёлтый скос за счет ферментации глюкозы. После исчерпания глюкозы в аэробных условиях скоса реакция возвращается к щелочной (красный скос), в то время как в анаэробном столбике среда остается кислой (жёлтый столбик).
  • Ферментаторы лактозы: Образуют жёлтые скосы и столбики.
  • Неферментаторы глюкозы и лактозы: Среда сохраняет исходный красный цвет.
  • Газообразование: Определяется по наличию пузырьков, трещинам или смещению агара в столбике.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите пробирки до 45–50 °C в наклонном положении для формирования скоса со столбиком длиной около 25 мм (1 дюйм).

Примечание: Избегайте перегрева, чтобы предотвратить выпадение осадка. Не используйте пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками.

Посев и анализ

• Тип образца: Изолированные микроорганизмы из проб пищевых продуктов, молочных продуктов и воды.
• Процедура: Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
• Сроки анализа: Результаты необходимо фиксировать через 18–24 часа инкубации. Более поздний срок может привести к ошибочным результатам.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: В плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: При температуре +2…+8 °C.
• Срок годности: Использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: Для получения достоверных результатов следует использовать только чистые изоляты.
• Безопасность: При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности. Используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: Загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами.