HiMedia MCD049-500G Фиолетово-красный желчный HiCynth агар

Питательная агаровая среда HiMedia MCD049-500G Фиолетово-красный желчный HiCynth агар выпускается в виде порошка и предназначена для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенов. HiMedia MCD049-500G применяется для анализа воды, молока, молочных и пищевых продуктов, а также клинических образцов; рекомендуемая температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения, обнаружения и количественного определения бактерий группы коли-аэрогенов в:

• воде;
• молоке;
• других молочных продуктах;
• пищевых образцах;
• клинических образцах.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: агаровая питательная среда
• Наименование: фиолетово-красный желчный HiCynth агар
• Артикул: MCD049-500G
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Тип упаковки: HDPE
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Состав

Содержание компонентов указано в г/л.

* Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

** Пептоны с химически определённым составом.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при перемешивании до кипения до полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Немедленно разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие инокулят.

При необходимости среду допускается стерилизовать в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин. Это указание приведено производителем отдельно от основной процедуры, в которой предусмотрено приготовление среды без автоклавирования.

Принцип действия и интерпретация

Группа колиформных бактерий включает несколько родов семейства Enterobacteriaceae. Исторически определение этой группы основывалось на методе обнаружения, то есть на ферментации лактозы.

Колиформные бактерии определяются как аэробные и факультативно-анаэробные, грамотрицательные, неспорообразующие палочковидные бактерии, которые ферментируют лактозу с образованием газа и кислоты в течение 48 ч при 35 °C.

Исследование пищевых продуктов, ингредиентов и сырья на наличие маркерных групп, включая колиформные бактерии, является распространённым видом микробиологического контроля. Фиолетово-красный желчный агар представляет собой модификацию исходной рецептуры МакКонки и применяется для количественного определения бактерий группы коли-аэрогенов.

Селективное действие среды обеспечивается ингибирующими компонентами — кристаллическим фиолетовым и синтетическим моющим веществом — совместно с индикаторной системой из лактозы и нейтрального красного. Рост многих нежелательных микроорганизмов подавляется, что позволяет проводить предварительную идентификацию исследуемых бактерий по внешнему виду колоний.

Фиолетово-красный желчный HiCynth агар отличается от классической рецептуры заменой пептонов животного происхождения на пептоны с химически определённым составом, а желчных солей — на синтетическое моющее вещество в качестве селективного ингибирующего компонента, используемого совместно с кристаллическим фиолетовым. Такая рецептурная замена исключает риски, связанные с BSE, TSE и GMO, характерные для пептонов животного происхождения.

Микроорганизмы, быстро ферментирующие лактозу, образуют фиолетовые колонии, окружённые фиолетовыми ореолами. Неферментирующие микроорганизмы или микроорганизмы с поздней ферментацией лактозы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.

Фиолетово-красный желчный агар рекомендуется APHA и также рекомендован ISO. Селективность среды может быть повышена инкубацией в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — 42 °C и выше.

Функции компонентов среды:

• пептоны HiCynth™ № 2 и № 5 — источники углерода, азота, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ;
• лактоза — сбраживаемый углевод, использование которого приводит к образованию кислот;
• нейтральный красный — индикатор образующейся кислотности;
• кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее вещество — ингибиторы сопутствующей грамположительной и неспецифической микрофлоры;
• хлорид натрия — компонент для поддержания осмотического равновесия.

Среда не является полностью специфичной для представителей кишечной группы: другие сопутствующие бактерии также могут давать аналогичную реакцию. Для подтверждения видовой принадлежности необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Типы образцов

• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Условия работы и меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.

При работе с образцами и культурами:

• используйте защитные перчатки;
• надевайте защитную одежду;
• используйте средства защиты глаз;
• используйте средства защиты лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики;
• выполняйте стандартные меры предосторожности, установленные для работы с образцами;
• при необходимости руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к росту и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на данной среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для работы с конкретным микроорганизмом, не указанным в сертификате анализа, рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция 4,15%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7