HiMedia MCD049-100G Фиолетово-красный желчный HiCynth агар

Сухая питательная среда HiMedia MCD049-100G Фиолетово-красный желчный HiCynth агар на основе химически определённых пептонов предназначена для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенезных бактерий. Применяется для анализа воды, молока, молочных и других пищевых продуктов, а также клинических образцов; для окончательной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.

Назначение и область применения

Среда предназначена для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенезных бактерий в следующих типах образцов:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• вода;
• клинические образцы.

Среда используется для исследования пищевых продуктов, ингредиентов и сырья на наличие колиформных бактерий как санитарно-показательной группы.

Состав

Компоненты на 1 л среды:

• Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

* Химически определённые пептоны.

Происхождение и форма продукта

Принцип действия и интерпретация

Колиформная группа включает несколько родов бактерий семейства Enterobacteriaceae. Исторически определение этой группы основывалось на методе обнаружения — ферментации лактозы. Колиформные бактерии определяются как аэробные и факультативно-анаэробные грамотрицательные неспорообразующие палочковидные бактерии, которые ферментируют лактозу с образованием газа и кислоты в течение 48 ч при 35 °C.

Фиолетово-красный желчный агар представляет собой модификацию исходной рецептуры МакКонки и используется для количественного определения коли-аэрогенезной бактериальной группы. Селективность среды обеспечивается ингибирующими компонентами — кристаллическим фиолетовым и синтетическим моющим веществом, а индикация основана на ферментации лактозы и изменении окраски нейтрального красного.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептоны HiCynth™ № 2 и № 5 служат источниками углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза является ферментируемым углеводом, использование которого приводит к образованию кислот;
• нейтральный красный выявляет образовавшуюся кислотность;
• кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее вещество подавляют сопутствующую грамположительную и неспецифическую микрофлору;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• агар формирует гелевую основу питательной среды.

Модификация HiCynth™ предусматривает замену пептонов животного происхождения химически определёнными пептонами для исключения рисков BSE/TSE/GMO, связанных с использованием пептонов животного происхождения. Желчная соль заменена синтетическим моющим веществом, которое используется как селективный ингибирующий компонент совместно с кристаллическим фиолетовым.

Микроорганизмы, быстро ферментирующие лактозу, образуют фиолетовые колонии, окружённые фиолетовыми ореолами. Неферментирующие микроорганизмы и поздние ферментаторы лактозы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.

Среда не является полностью специфичной для представителей кишечной группы: другие сопутствующие бактерии могут давать такую же реакцию. Для положительной идентификации необходимы дополнительные биохимические исследования.

VRBA рекомендуется APHA и также указан в рекомендациях ISO. Селективность среды может быть повышена при инкубации в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — 42 °C и выше.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при перемешивании до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Не автоклавируйте приготовленную среду в стандартном режиме.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Немедленно разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие посевной материал.
6. При необходимости среду можно стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.

Тип образца и обращение с ним

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция 4,15%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения: (*) соответствующие номера WDCM; (#) ранее использовалось название Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды оптимальны при использовании в течение указанного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различные варианты роста на данной среде.
2. Каждая партия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в COA, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований.
3. Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.
4. Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MCD049-100G
• Назначение изделия: агар
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Температура приготовления без автоклавирования: охлаждение до 45–50 °C перед разливом
• Альтернативный режим стерилизации: автоклавирование при 121 °C в течение 15