HiMedia MCD043-500G Основа HiCynth агара Бэрд-Паркера

Основа HiCynth агара Бэрд-Паркера HiMedia MCD043-500G — сухая питательная среда для изоляции и количественного определения коагулазеположительных стафилококков. Применяется для анализа пищевых продуктов и молочной продукции; содержит химически определенные пептоны HiCynth™.

Принцип измерения

Среда разработана для дифференциации коагулазеположительных штаммов стафилококков. Основные механизмы идентификации:

• Лецитиназная активность: лецитиназа стафилококков расщепляет яичный желток, что приводит к образованию прозрачной зоны липолиза вокруг колоний.
• Восстановление теллурита: почти 100 % коагулазеположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит, что придает колониям черный цвет.
• Селективность: хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры. Глицин и пируват стимулируют рост Staphylococcus aureus.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 63,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл селективной добавки PTe 3,5 % (FD047);
   • ИЛИ 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
6. Для повышения селективности (по желанию) добавить содержимое 1 флакона селективной добавки BP S (FD069).
7. В качестве альтернативы для идентификации коагулазеположительных стафилококков можно использовать 1 флакон ингибитора FPT (FD195) на 90 мл среды вместо FD046.
8. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

1. Внести исследуемый материал (0,1 мл на чашку диаметром 90–100 мм).
2. Инкубировать при 37 °C.
3. Первый считываемый результат получить через 24–26 часов. Колонии Staphylococcus aureus выглядят черными, блестящими, с тонким белым ободком и прозрачной зоной вокруг.
4. Инкубировать при 37 °C еще 24 часа.
5. Провести тест на коагулазу для колоний с характерными признаками.
6. Для количественного анализа выбрать 20–200 колоний, resembling S. aureus, и подтвердить их коагулазной реакцией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Результаты получены после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов. Скорость восстановления (Recovery) указана относительно роста на агаре соевого казеина.

Область применения и ограничения

• Назначение: изоляция и подсчет стафилококков в пищевых и молочных продуктах.
• Ограничения: возможен рост других бактерий; для окончательного подтверждения вида S. aureus обязательно проведение биохимических тестов (коагулазный тест).
• Особенности: использование среды соответствует рекомендациям ISO и USP (Microbial Limit Tests).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскочности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Срок использования: готовые чашки следует использовать в день приготовления или в течение 48 часов, чтобы избежать потери четкости зон осаждения.
• Требования к безопасности: только для профессионального использования. Требуется использование СИЗ (перчатки, одежда, защита глаз).

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.