HiMedia MCD043-100G Основа HiCynth агара Бэрд-Паркера

Основа HiCynth агара Бэрд-Паркера HiMedia MCD043-100G предназначена для изоляции и подсчета коагулазоположительных стафилококков. Среда применяется для анализа пищевых продуктов и молочных проб; содержит химически определенные пептоны HiCynth™ для обеспечения воспроизводимости результатов.

Принцип измерения

Агар Бэрд-Паркера разработан для дифференциации коагулазоположительных штаммов стафилококков. Принцип работы основан на следующих реакциях:

• Лецитиназная активность: лецитиназа стафилококков расщепляет яичный желток, что приводит к образованию прозрачной зоны липолиза вокруг колоний. Существует высокая корреляция между этим признаком и положительной коагулазной реакцией.
• Восстановление теллурита: почти 100 % коагулазоположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит, в результате чего образуются черные колонии.
• Селективность: хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры, при этом среда менее ингибирует Staphylococcus aureus по сравнению с аналогичными средами.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 63,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл селективной добавки PTe 3,5 % (FD047);
   • либо 50 мл эмульсии яичного желтка Tel (FD046).
6. Для повышения селективности (при необходимости) добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки BP S (FD069).
7. В качестве альтернативы для идентификации коагулазоположительных стафилококков можно использовать 1 флакон ингибитора FPT (FD195) на 90 мл среды вместо FD046.
8. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

1. Внесите исследуемый материал (0,1 мл на чашку диаметром 90–100 мм).
2. Инкубируйте при 37 °C.
3. Проведите первый считывание результатов через 24–26 часов. Колонии Staphylococcus aureus выглядят черными, блестящими, с тонким белым ободком и прозрачной зоной вокруг.
4. Инкубируйте еще 24 часа при 37 °C.
5. Выберите 20–200 колоний с характерными признаками и проведите подтверждающий тест на коагулазу.
6. Рассчитайте количество Staphylococcus aureus на грамм продукта.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Тип продукта: HiCynth™ (химически определенный)
• Физическая форма: порошок
• Цвет и вид: от кремового до желтого гомогенный свободнотекучий порошок
• pH (6,3 % водный раствор при 25 °C): 6,80–7,20
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаром
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г

Область применения и ограничения

Применяется для анализа пищевых и молочных продуктов. Ограничения:

• Несмотря на селективность к коагулазоположительным Staphylococcus aureus, возможен рост других бактерий.
• Для окончательного подтверждения вида необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Культуральные характеристики

Результаты наблюдались после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов. Скорость восстановления (Recovery) указана относительно роста на агаре соя-казеин-дигест (Soyabean Casein Digest Agar), принятом за 100 %.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать крышку во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Срок использования чашек: использовать в день приготовления или в течение 48 часов, чтобы избежать потери четкости зон осаждения.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат обязательному обеззараживанию путем автоклавирования или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.