HiMedia MCD031-500G XLD HiCynth агар (ксилозо-лизин-дезоксихолатный)

Селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia MCD031-500G XLD HiCynth агар (ксилозо-лизин-дезоксихолатный) — химически определённый порошкообразный агар массой 500 г. Применяется для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella в пищевых, молочных и водных образцах; синтетическое моющее средство обеспечивает ингибирование грамположительных микроорганизмов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella.

Тип образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• вода.

Состав

Состав, г/л:

* Пептоны с химически определённым составом.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными эксплуатационными параметрами.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до закипания среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню при 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие продолжительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка.

В среде может появляться небольшой осадок. Это свойство состава среды и не влияет на её рабочие характеристики.

Принцип действия и интерпретация

XLD-агар применяют для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического исследования. Среда разработана для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

XLD HiCynth™ агар представляет собой химически определённую среду, не содержащую пептонов животного и растительного происхождения. По сравнению с другими плотными средами, включая SS HiCynth™ агар (MCD108), агар ЭМС (M022) и бисмут-сульфитный HiCynth™ агар (MCD027), состав обеспечивает повышенную селективность и чувствительность. Формула среды предотвращает чрезмерный рост других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены совместно с другой смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV (M1482).

Механизм дифференциации

• Пептон HiCynth™ № 5 обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами, необходимыми для роста.
• Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов.
• Ксилоза включена в состав для дифференциации видов Shigella, поскольку ксилоза не ферментируется Shigella, но практически всеми представителями кишечной группы ферментируется.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов.
• Salmonella быстро ферментирует ксилозу, после чего запас ксилозы в среде исчерпывается. Затем фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов и восстановлением щелочного pH, что имитирует реакцию Shigella.
• Для предотвращения аналогичной реакции у лизин-положительных колиформных бактерий в состав добавлены лактоза и сахароза, обеспечивающие образование избытка кислоты.
• Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый.
• Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH.
• Реакции могут протекать одновременно или последовательно. При длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или менять цвет с жёлтого на красный.
• Для дополнительной дифференциации используется система индикации H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа. Образование сероводорода приводит к появлению колоний с чёрными центрами.
• Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся кислотная реакция предотвращает почернение колоний.

XLD-агар является одновременно селективной и дифференциальной средой. Селективным агентом служит синтетическое моющее средство № III, поэтому среда подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Ограничения и мешающие факторы

1. В среде может образовываться небольшой осадок; это свойство состава среды, не влияющее на рабочие характеристики.
2. Некоторые штаммы Proteus могут давать окраску от красной до жёлтой, при этом большинство колоний развивает чёрные центры, что приводит к ложноположительным реакциям.
3. Непредставители кишечной группы, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
4. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, напоминая виды Shigella.
5. Для полной идентификации требуется дополнительное биохимическое или серологическое исследование.
6. Из-за различий в потребностях микроорганизмов в питательных веществах некоторые виды могут демонстрировать различные картины роста.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам.

Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

• Внешний вид: от светло-жёлтого до розового, однородный, сыпучий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,67 % масс./об. при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на триптиказо-соевом агаре.