HiMedia MCD031-100G XLD HiCynth агар (ксилозо-лизин-дезоксихолатный)

Микробиологическая питательная среда HiMedia MCD031-100G XLD HiCynth агар (ксилозо-лизин-дезоксихолатный) — химически определённый агар в порошке массой 100 г. Среда предназначена для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella; при приготовлении среду нельзя автоклавировать или перегревать.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella.

Тип образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• пробы воды.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

* Пептоны с химически определённым составом.

Принцип действия и интерпретация

XLD-агар рекомендован для идентификации энтеробактерий и микробиологического анализа. Среда разработана для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

XLD HiCynth™ агар является химически определённой средой, не содержащей пептонов животного и растительного происхождения. Среда обеспечивает селективность и дифференциацию за счёт синтетического моющего средства № III, которое ингибирует грамположительные микроорганизмы. Формула не допускает чрезмерного роста других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

По сравнению с другими плотными питательными средами, включая SS HiCynth™ агар (MCD108), агар ЭМБ (M022) и бисмут-сульфитный HiCynth™ агар (MCD027), XLD-агар используется для селективного выделения и дифференциации кишечных патогенов.

Пептон HiCynth™ № 5 обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами, необходимыми для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза являются источниками ферментируемых углеводов. Ксилоза включена в состав для дифференциации видов Shigella, поскольку Shigella не ферментирует ксилозу, тогда как практически все энтеробактерии способны её ферментировать.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро ферментирует ксилозу и истощает её запас. После этого лизин декарбоксилируется ферментом лизиндекарбоксилазой с образованием аминов, в результате чего pH снова смещается в щелочную область и реакция становится похожей на реакцию Shigella.

Для предотвращения аналогичной реакции у лизин-положительных колиформ в состав включены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот приводит к изменению цвета индикатора фенолового красного на жёлтый. Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH.

Реакции могут протекать одновременно или последовательно. Поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или менять цвет с жёлтого на красный.

Для дополнительной дифференциации в среду включена система индикации H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония железа. Система позволяет визуализировать образующийся сероводород по появлению колоний с чёрными центрами. Непатогенные микроорганизмы, продуцирующие H₂S, не декарбоксилируют лизин; образующаяся при этом кислая реакция препятствует почернению колоний.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены вместе со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV (M1482).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до закипания среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие длительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка.

В среде может появляться небольшой осадок. Это свойство среды не влияет на её эффективность.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами.
• Информацию по безопасности можно получить в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. В среде может появляться небольшой осадок. Это свойство среды не влияет на её эффективность.
2. Некоторые штаммы Proteus могут вызывать окрашивание от красного до жёлтого у большинства колоний с образованием чёрных центров, что приводит к ложноположительным реакциям.
3. Неэнтеробактерии, например Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
4. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, напоминая виды Shigella.
5. Для полной идентификации требуются дополнительные биохимические или серологические исследования.
6. Из-за различий в потребностях микроорганизмов в питательных веществах некоторые виды могут демонстрировать различный характер роста.

Контроль качества

• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 5,67 % масс./об. при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на триптон-соевом агаре (TSA).