HiMedia MCD029-100G HiCynth агар Эндо

Селективная агаровая питательная среда HiMedia MCD029-100G HiCynth агар Эндо — химически определённая среда с лактозой для дифференциации бактерий по ферментации лактозы. HiMedia MCD029-100G применяют для подтверждения предположительного теста на бактерии группы кишечной палочки в образцах пищевых продуктов, молочной продукции и воды; помимо энтеробактерий на среде могут расти другие грамотрицательные бактерии и дрожжи.

Назначение

Среда рекомендована для подтверждения предположительного теста на представителей группы кишечной палочки.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Среда HiCynth™ агар Эндо содержит химически определённые пептоны HiCynth™ вместо пептонов животного и растительного происхождения. Это позволяет исключить риски, связанные с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями, характерными для пептонов животного происхождения.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 41,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
6. Если затвердевшая культуральная среда имеет чрезмерно красный цвет, добавьте для его удаления несколько капель свежеприготовленного 10%-ного раствора сульфита натрия — не более 1 мл/л.
7. Прокипятите среду после добавления раствора сульфита натрия.

Принцип действия и интерпретация

Агар Эндо разработан для дифференциации грамотрицательных бактерий по способности ферментировать лактозу и одновременного подавления роста грамположительных бактерий. Подавление грамположительных микроорганизмов достигается без использования желчных солей, применявшихся в традиционных составах: селективность обеспечивают сульфит натрия и основной фуксин.

Агар Эндо также известен как фуксин-сульфитный и инфузионный агар; первоначально среду применяли для выделения возбудителей брюшного тифа. На протяжении времени состав среды неоднократно модифицировался. Среда используется при микробиологическом исследовании воды, сточных вод, молочной продукции и пищевых продуктов.

Пептон HiCynth™ № 1 обеспечивает бактерии азотом, углеродом, витаминами и минеральными веществами, необходимыми для роста. Сульфит натрия и основной фуксин подавляют грамположительные микроорганизмы и придают среде селективные свойства.

• Колонии колиформных бактерий при ферментации лактозы окрашиваются в розовый цвет.
• Неферментирующие лактозу бактерии формируют бесцветные колонии.
• Для Escherichia coli реакция выражена особенно интенсивно: фуксин кристаллизуется, поэтому колонии приобретают постоянный зеленовато-металлический блеск, называемый фуксиновым блеском.
• Среду следует хранить защищённой от света во избежание фотоокисления.

Образцы

Типы образцов:

• пищевые продукты и молочная продукция;
• вода.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых продуктов и молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов с учётом руководств и местных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Помимо представителей Enterobacteriaceae, на среде могут расти другие грамотрицательные бактерии и дрожжи.
• Не допускайте воздействия света на среду: фотоокисление может снизить её рабочие характеристики.
• Не перегревайте среду, поскольку перегрев может ухудшить её рабочие характеристики.
• Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, хорошо сыпучий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель оранжево-розового цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий; в чашках Петри образуется мелкодисперсный осадок.
• Реакция: реакция 4,15%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,30–7,70.
• Расчётный pH: 7,5 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.