HiMedia MCD024-100G Основа HiCynth агара с цетримидом

Основа HiCynth агара с цетримидом HiMedia MCD024-100G предназначена для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa. Среда используется для анализа проб воды, косметических средств и клинических образцов, а также для оценки эффективности дезинфицирующих средств.

Принцип измерения

Селективность среды основана на использовании цетримида — четвертичного аммониевого соединения, которое действует как катионный детергент. Цетримид снижает поверхностное натяжение в точке контакта, оказывая осаждающее, комплексующее и денатурирующее воздействие на мембранные белки бактерий. Это подавляет рост большинства микроорганизмов, включая другие виды Pseudomonas, но позволяет развиваться Pseudomonas aeruginosa.

Для стимуляции выработки пиоцианина (синего водорастворимого нефлуоресцентного феназинового пигмента) в состав включены хлорид магния и сульфат калия. Идентификация P. aeruginosa осуществляется по характерной морфологии колоний, специфическому запаху аминоацетофенона (напоминает виноград) и продукции пиоцианина.

Основа HiCynth™ разработана с заменой пептонов животного и растительного происхождения на химически определенные пептоны для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,7 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. При необходимости асептически добавьте содержимое одного флакона селективной добавки NA (FD130) на 1000 мл среды.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Посев и интерпретация

Для выделения P. aeruginosa рекомендуется проводить инокуляцию из неселективных сред, таких как бульон BHI HiCynth™ (MCD210) или соево-казеиново-триптонный бульон HiCynth™ (MCD011). При высокой обсемененности возможен прямой посев пробы.

Инкубацию проводят при 37 °C в течение 18–24 ч.

Интерпретация результатов:

• Положительный результат: колонии синего, сине-зеленого цвета или беспигментные, проявляющие флуоресценцию при 250 нм.
• Особенности: P. aeruginosa может временно терять флуоресценцию при хранении при комнатной температуре; она восстанавливается после повторной инкубации.
• Ложноположительные реакции: некоторые неферментирующие бактерии и аэробные спорообразующие могут давать коричневатую пигментацию; Serratia может проявлять розовую пигментацию.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение компонентов: химически определенные (HiCynth™)
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до желтого, однородный свободнотекущий idea-тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 100 г
• pH готовой среды: 7,00–7,40
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 1,5 % агаром
• Вид готовой среды: светло-янтарный опалесцирующий гель с небольшим осадком

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 часов. Скорость восстановления считается 100 % при росте бактерий на соево-казеиновом дигестате HiCynth™ агаре.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб воды и контроля микробиологической чистоты косметических средств.

Ограничения:

1. Среда является селективной; некоторые штаммы могут демонстрировать плохой рост из-за высокой токсичности цетримида.
2. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, требует плотного закрытия крышки для предотвращения комкования.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.