HiMedia MCD021-500G Трехсахарный железный HiCynth агар

Порошковая дифференциально-диагностическая питательная среда HiMedia MCD021-500G Трехсахарный железный HiCynth агар предназначена для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы и образованию H₂S. Среда применяется для микробиологического анализа пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, подтверждения присутствия Salmonella и идентификации грамотрицательных бацилл; для различения Salmonella и Proteus используется параллельно с мочевинным агаром или бульоном.

Назначение

Трёхсахарный железный HiCynth агар применяется для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл на основании:

• ферментации декстрозы;
• ферментации лактозы;
• ферментации сахарозы;
• образования сероводорода H₂S.

Среда предназначена для исследования мяса и пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, проведения микробиологического предельного теста для подтверждения присутствия Salmonella, а также идентификации грамотрицательных бацилл. Среду следует использовать параллельно с мочевинным агаром или бульоном для различения видов Salmonella и Proteus.

Состав

Состав приведён в граммах на 1 л среды.

* Пептоны с химически определённым составом.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Трёхсахарный железный агар первоначально предложен Sulkin и Willett и модифицирован Hajna для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда соответствует рекомендациям APHA для исследования мяса и пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, проведения микробиологического предельного теста для подтверждения присутствия Salmonella, а также идентификации грамотрицательных бацилл.

Трёхсахарный железный HiCynth агар модифицирован с применением пептонов с химически определённым составом, не содержащих пептоны животного и растительного происхождения. Это позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), которые ассоциируются с пептонами животного происхождения.

Компоненты HiCynth™ Peptone No.1 и HiCynth™ Peptone No.6 обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются сбраживаемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для определения H₂S. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, вследствие чего цвет среды изменяется с красного на жёлтый. В столбике среды при ферментации выделяется больше кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты окислительного декарбоксилирования пептонов. Эти щелочные продукты нейтрализуют большое количество кислоты, присутствующей в столбике.

Щелочная скошенная часть красного цвета и кислый жёлтый столбик после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно в дополнение к глюкозе, образуют большое количество кислоты. В этой области обратного сдвига pH не происходит, поэтому скошенная часть и столбик остаются кислыми.

Образование газа определяется по наличию трещин или пузырьков в среде, возникающих при выходе накопившегося газа. Газ может представлять собой CO₂. Тиосульфат восстанавливается несколькими видами бактерий до сероводорода H₂S. Сероводород соединяется с ионами железа железосодержащих солей с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Некоторые представители Enterobacteriaceae и продуцирующие H₂S штаммы Salmonella могут не давать положительную реакцию на H₂S на трёхсахарном железном HiCynth агаре. Некоторые бактерии образуют H₂S на железном агаре Клиглера HiCynth, но не на трёхсахарном железном HiCynth агаре. Это может происходить вследствие того, что утилизация сахарозы в трёхсахарном железном HiCynth агаре подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Сводная интерпретация реакций

• Щелочная скошенная часть и кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислая скошенная часть и кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, глюкоза и лактоза либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Пузырьки или трещины: образование газа.
• Чёрный осадок: образование H₂S.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 64,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте смесь до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно 0,103 МПа.
5. Дайте среде застыть в наклонном положении, сформировав столбик длиной около 25,4 мм (1″).

Для получения лучших результатов допускается стерилизация в автоклаве при температуре 115 °C в течение 15 мин и давлении 10 фунтов на квадратный дюйм, ориентировочно 0,069 МПа.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной