Основа агара для кампилобактерий HiMedia M994-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа агара для кампилобактерий HiMedia M994-500G (уп/500 гр) — порошковая основа для селективного выделения видов Campylobacter после внесения соответствующих добавок. Применяется для анализа фекальных, пищевых и объектов внешней среды; использование требует добавления селективной добавки и крови.

Назначение

Основа агара для кампилобактерий M994 предназначена для селективного выделения видов Campylobacter из:

• клинических образцов — фекалий;
• пищевых и молочных продуктов;
• образцов объектов внешней среды.

Среда является высокопитательной базовой средой. Для селективного выделения перед использованием в неё добавляют стерильную лизированную кровь лошади или стерильную дефибринированную кровь овцы, а также селективную добавку Blaser–Wang FD006 или Skirrow FD008.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Состав эквивалентен среде на основе печёночного гидролизата.

Принцип действия и интерпретация результатов

Виды Campylobacter широко распространены в окружающей среде и заселяют различные экологические ниши. Инфекции, вызываемые видами Campylobacter, относятся к наиболее распространённым причинам бактериального гастроэнтерита у человека. Большинство видов обнаруживается у животных, включая крупный рогатый скот и свиней, и может вызывать бесплодие и аборты.

Campylobacter jejuni первоначально выделяли на средах с кровью и антибиотиками. Скирроу описал селективную среду для видов Campylobacter на основе кровяного агара № 2 с добавлением крови лошади и антибиотиков. Позднее Blaser и соавторы выделяли C. jejuni на агаре Brucella с добавлением крови овцы и четырёх антибиотиков. Для повышения селективности среды за счёт подавления сопутствующей фекальной микрофлоры позднее был добавлен пятый антибиотик — цефалотин.

Основа агара для кампилобактерий рекомендована APHA для селективного выделения видов Campylobacter. Пептон протеозный, HL Digest и дрожжевой экстракт обеспечивают питательную основу для роста микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Кровь служит дополнительным источником питательных веществ, включая фактор X.

Селективные добавки Blaser–Wang FD006 и Skirrow FD008 существенно подавляют рост нормальной кишечной микрофлоры и способствуют росту и выделению C. jejuni из фекальных образцов. Амфотерицин B в составе добавки Blaser–Wang в значительной степени или полностью подавляет рост грибов.

Колонии C. jejuni могут иметь следующие признаки:

• отсутствие гемолиза;
• плоская форма;
• серый цвет;
• неправильный край;
• либо приподнятая округлая форма и слизистый вид;
• у некоторых штаммов — желтовато-коричневая или слегка розовая окраска;
• на влажной поверхности возможно роение.

Инкубация при 35–37 °C может приводить к замедленному росту культур C. jejuni. Инкубация при 42 °C может ускорить рост.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 19,75 г сухой среды и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 40–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов крови:
   • 5–7 % об./об. стерильной лизированной крови лошади;
   • 10 % стерильной дефибринированной крови овцы.
6. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки:
   • селективной добавки Blaser–Wang FD006;
   • или селективной добавки Skirrow FD008.
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика обогащения и высева пищевых образцов

1. Загрязнённый пищевой образец массой 10–25 г внесите в основу бульона для обогащения кампилобактерий M899 с добавкой FD042.
2. Инкубируйте бульон при перемешивании в микроаэробной атмосфере в течение 16–18 ч.
3. После обогащения выполните высев культуры на селективную среду — основу агара для кампилобактерий M994.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в атмосфере с пониженным содержанием кислорода после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Для оценки используют селективные добавки Blaser–Wang FD006 и Skirrow FD008.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: основа
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный гель жёлтого цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. лизированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель красновато-коричневого цвета.

Реакция

Реакция 3,95%-ного раствора в воде при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Ожидаемые характеристики эффективности

Эффективность среды обеспечивается при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы сбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.

Для клинических образцов и образцов объектов внешней среды применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно утверждённым руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на данной среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований исследования.
3. Для анализа необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Меры безопасности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Информацию по безопасности можно получить из соответствующих паспортов безопасности.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Храните продукт в плотно закрытом контейнере.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения заявленных характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.

Комплект поставки и совместимые добавки

По заявке поставляются:

• FD006 Campylobacter Supplement-I (Blaser–Wang) — добавка для кампил