HiMedia M975A-500G Основа анаэробного кровяного агара

Обезвоженная питательная среда HiMedia M975A-500G Основа анаэробного кровяного агара с конечным pH 7,4±0,2. Применяется для культивирования анаэробных микроорганизмов, включая требовательные виды из клинических образцов, с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови овцы.

Назначение

Основа анаэробного кровяного агара предназначена для приготовления питательной неселективной среды для культивирования анаэробных, аэробных и микроаэрофильных микроорганизмов, включая требовательные клинически значимые виды.

Тип образца: клинические образцы — кал, материал из абсцессов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 44,0 г сухой основы и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона добавки витамина K₁ (FD114).
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Основа анаэробного кровяного агара представляет собой питательную неселективную среду, пригодную для культивирования требовательных анаэробов, а также аэробных и микроаэрофильных микроорганизмов.

Добавление крови к основе способствует образованию типичного пигмента у Bacteroides melaningenicus и выявлению двойной зоны гемолиза у Clostridium perfringens. Внутренняя зона гемолиза обусловлена действием токсина, а наружная зона неполного гемолиза — активностью лецитиназы.

Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Гемин и витамин K₁ поддерживают рост требовательных бактерий, включая виды Bacteroides, а также грамположительных спорообразующих бактерий рода Clostridium. Добавление крови обеспечивает микроорганизмы питательными веществами и позволяет дифференцировать гемолитические виды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Цвет: от жёлтого до коричневато-жёлтого.

Форма: однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: жёлтого цвета.
• Основная среда с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы: вишнёво-красного цвета.
• Основная среда: слегка опалесцирующая.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови овцы: непрозрачный гель в чашках Петри.

Реакция

Реакция 4,4 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4±0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации в течение 24–48 ч при 35–37 °C и концентрации CO₂ 5–10 %.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Продукт гигроскопичен; ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, проветриваемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении температуры хранения.

Обращение с образцами и меры безопасности

При работе с клиническими образцами применяйте утверждённые методы обращения и обработки образцов.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с продуктом, образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности при обращении с клиническими образцами. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Из-за вариаций питательных потребностей отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом: автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.