HiMedia M972I-500G Желчно-эскулиновый агар

Сухая питательная среда HiMedia M972I-500G Желчно-эскулиновый агар производства HiMedia для выделения и идентификации Yersinia enterocolitica из пищевых продуктов и кормов для животных, с содержанием желчных солей 40,000 г/л. Среда применяется для ферментационного определения эскулина и дифференциации микроорганизмов по почернению среды; хранение готовой среды выполняют при 2–8 °C.

Назначение

Желчно-эскулиновый агар предназначен для выделения и идентификации Yersinia enterocolitica из пищевых продуктов и кормов для животных. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 10273:1994.

Среда также рекомендована APHA для идентификации стрептококков группы D.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Yersinia enterocolitica является возбудителем иерсиниоза — тяжёлой формы гастроэнтерита человека.

Желчно-эскулиновый агар M972I предназначен для выделения и идентификации Yersinia enterocolitica в соответствии с ISO 10273:1994. Среда с содержанием 4 % желчных солей разработана Swan и модифицирована Facklam и Moody.

Микроорганизмы гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин вступает в реакцию с цитратом железа, образуя тёмно-коричневый или чёрный комплекс.

Пептический перевар тканей животного происхождения и мясной экстракт служат источниками углерода, азота и необходимых факторов роста. Желчные соли подавляют сопутствующие грамположительные бактерии.

При ферментации эскулина положительной реакцией считается образование чёрного ореола вокруг колоний.

Методика проведения анализа

1. Обогатите исследуемую пробу в PSB-бульоне M941 или ITC-бульоне M1220.
2. После обогащения перенесите петлю культуры или 0,5 мл культуры на селективную агаровую основу для Yersinia M834.
3. Инкубируйте при 30 °C в течение 24 ч.
4. Отберите типичные колонии с красным центром для дальнейшего биохимического тестирования.
5. Для изучения ферментации эскулина нанесите петлю культуры штрихом на желчно-эскулиновый агар M972I.
6. Интерпретируйте результат: образование чёрного ореола вокруг колоний указывает на положительную реакцию.

Указания по приготовлению

1. Суспендируйте 64,5 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки или колбы.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Для приготовления скошенной среды оставьте среду в пробирках для затвердевания в наклонном положении; глубина столбика должна составлять 2,5 см.
6. Допускается разлить среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок от светло-жёлтого до желтовато-коричневого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри или пробирках в виде скошенной среды образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета с голубоватым оттенком.
• Реакция: реакция 6,45%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики M9721 оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип изделия: агар.
• Физическая форма: порошок.
• Происхождение компонентов: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Тип упаковки: HDPE.
• Масса: 500 г.
• Температура: 10–30 °C.
• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2.
• pH приготовленной среды: 6,40–6,80.
• Концентрация для приготовления: 64,5 г/1000 мл.
• Температура стерилизации: 121 °C.
• Время стерилизации: 15 мин.
• Давление стерилизации: 15 фунтов (≈0,103 МПа).
• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок хранения: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Ограничения и условия применения

• Для выделения Yersinia enterocolitica требуется предварительное обогащение исследуемой пробы в PSB-бульоне M941 или ITC-бульоне M1220.
• После обогащения культуру переносят на селективную агаровую основу для Yersinia M834 и инкубируют при 30 °C в течение 24 ч.
• Типичные колонии с красным центром необходимо дополнительно исследовать биохимическими методами.
• Желчные соли подавляют сопутствующие грамположительные бактерии.
• Для интерпретации ферментации эскулина используют образование чёрного ореола вокруг колоний.

Хранение

Хранить сухую среду в плотно закрытой ёмкости при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду хранить при 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.