Желчно-эскулиновый агар HiMedia M972-500G (уп/500 гр)

Питательная диагностическая среда Желчно-эскулиновый агар HiMedia M972-500G (уп/500 гр) — порошкообразный агар для микробиологического анализа. Применяется для выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов; среда может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Желчно-эскулиновый агар рекомендуется для выделения и предварительной идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов и фармацевтических препаратов.

Среда также может использоваться для дифференциации Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter и Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae по способности гидролизовать эскулин. Для идентификации энтерококков необходимо дополнительно выполнять другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Желчь эквивалентна бычьей желчи.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преобладающими нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Уникальная способность энтерококков расщеплять эскулин используется для их выявления. Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричнево-чёрного осадка.

Использование гидролиза эскулина для идентификации энтерококков впервые было описано Rochaix. Желчно-эскулиновый агар первоначально разработан Swan для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Facklam и Moody сообщили, что желчно-эскулиновый агар позволяет дифференцировать стрептококки группы D и стрептококки, не относящиеся к группе D.

Среда обладает высокой питательностью. Пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ. Желчь ингибирует большинство сопутствующих бактерий.

Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который визуализируется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

При разливе среды в пробирки в виде скошенного агара положительная реакция определяется по почернению более половины скошенной поверхности в течение 24–48 ч. Если почернение полностью отсутствует либо в течение 24–48 ч почернело менее половины скошенной поверхности, результат считают отрицательным.

Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, также дают положительный результат в желчно-эскулиновом тесте.

Для усиления роста энтерококков желчно-эскулиновый агар можно дополнить лошадиной сывороткой в концентрации 50 мл/л. Исследуемую пробу инокулируют и инкубируют в бульоне Todd Hewitt (M313). Через 24 ч две капли культуры наносят на поверхность скошенной среды или чашки с агаром.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 64,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Перемешайте и разлейте среду по пробиркам или колбам в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Дайте среде затвердеть в пробирках в наклонном положении.

Тип образца

Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Оценка эффективности

Эффективность среды ожидается при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или коричневато-жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри или пробирках в виде скошенной среды образуется гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, с голубоватым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 6,5 % масс./об. при 25 °C.

pH: 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации в атмосфере с повышенным содержанием диоксида углерода (CO₂) при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения