Основа селенитового бульона без селенита HiMedia M970-500G (уп/500 гр)

Основа селенитового бульона без селенита HiMedia M970-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для обогащения проб на наличие видов Salmonella в пищевых продуктах, молочных продуктах и патологических образцах при условии добавления селенита.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на селективном ингибирующем действии селенита для изоляции Salmonella Typhi. Обогащающие среды применяются для обнаружения патогенов в фекальных пробах, где концентрация возбудителей может быть крайне низкой на фоне кишечной микрофлоры. Селенитовый бульон эффективен при диагностике неострых стадий заболевания и в эпидемиологических исследованиях для выявления низкого количества микроорганизмов у бессимптомных или выздоравливающих пациентов.

Роль компонентов:

• Триптон: обеспечивает азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие основные питательные вещества.
• Лактоза: поддерживает pH среды.
• Селенит: восстанавливается в процессе бактериального роста с образованием щелочи. Повышение pH снижает токсичность селенита, что может привести к избыточному росту посторонней микрофлоры. Кислота, образующаяся при ферментации лактозы бактериями, помогает поддерживать нейтральный pH.
• Фосфат натрия: стабилизирует pH и снижает токсичность селенита.

После обогащения бульон пересевают на дифференциальные среды, такие как агар с висмутом и сульфитом (M027), агар с бриллиантовым зеленым (M016), агар XLD (M031) и др. Инкубацию бульона не следует проводить более 24 часов, так как ингибирующий эффект селенита снижается через 6–12 часов.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 4,0 г гидроселенита натрия (M1079B) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,0 г основы среды (M970).
3. Тщательно перемешайте и прогрейте для полного растворения компонентов.
4. Распределите по стерильным пробиркам.
5. Стерилизуйте в кипящей водяной бане или потоком пара в течение 10 минут.

Важно: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Чрезмерный нагрев губителен для среды. Если в готовой среде наблюдается большое количество осадка красного цвета (признак восстановления селенита), такую среду следует утилизировать.

Примечание: Вместо использования порошков можно добавить в среду после кипячения диски биселенита натрия (RM154, DD056 — 1 диск на 10 мл среды) или гранулы биселенита натрия (DB001 — 1 гранула на 100 мл среды).

Типы образцов и работа с ними

• Клинические образцы: фекалии, моча.
• Пищевые и молочные продукты.

При сборе и обработке образцов следует руководствоваться установленными стандартами и рекомендациями по работе с клиническим и пищевым материалом. После использования контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до светло-желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор от кремового до желтого цвета без осадка.
• Реакция: pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C (для раствора 1,9 % в/в среды с 0,4 % в/в водным раствором селенита).
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики оцениваются при добавлении гидроселенита натрия (M1079B) с последующим пересевом на агар МакКонки (M081) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* — соответствующие номера WDCM.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда является высокоселективной, поэтому может не поддерживать рост всех видов Salmonella. Для окончательной изоляции требуется восстановление на селективных средах.
• Только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать правила микробиологической безопасности.

Хранение и утилизация

• Хранить порошок в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C.
• Готовую среду хранить при температуре +15…+30 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть, чтобы предотвратить комкование.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Утилизация: путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.