Агар для определения микробного числа R2A HiMedia M962-500G (уп/500 гр)

Питательная агаризованная среда «Агар для определения микробного числа R2A HiMedia M962-500G (уп/500 гр)» предназначена для подсчёта гетеротрофных микроорганизмов при длительной инкубации посевов. Среда применяется для анализа подготовленных проб питьевой воды и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов, которые плохо растут на высокопитательных средах.

Назначение и область применения

Среда предназначена для определения гетеротрофного числа микроорганизмов (HPC) в пробах воды с использованием более длительных периодов инкубации.

Применяется для:

• оценки количества жизнеспособных гетеротрофных бактерий в воде;
• контроля изменений микробиологических показателей при водоподготовке;
• контроля воды в распределительных системах и плавательных бассейнах;
• восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов в пробах воды.

Тип образца: пробы воды.

Гетеротрофное число микроорганизмов, ранее называвшееся стандартным числом микроорганизмов, выражают в КОЕ (колониеобразующих единицах) на объём исследуемой пробы.

Среда R-2A рекомендована APHA для определения гетеротрофного числа методом заливочных посевов, поверхностных посевов или мембранной фильтрации. Рецептура основана на составе, разработанном Reasoner и Geldreich.

Принцип действия

Стрессированные или повреждённые микроорганизмы, подвергшиеся воздействию при водоподготовке, могут не расти на высокопитательных средах, поскольку быстрорастущие микроорганизмы подавляют их рост. Среда R-2A содержит пониженное количество питательных компонентов и при более длительной инкубации создаёт условия для восстановления и роста таких микроорганизмов.

Многие бактерии из природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным уровнем питательных компонентов. Для таких микроорганизмов оптимальными могут быть температуры ниже стандартных лабораторных температур инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Acicase, протеозопептон и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление азотистых и углеродсодержащих соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ;
• декстроза/глюкоза служит источником энергии;
• растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов, адсорбируя токсичные побочные продукты метаболизма;
• пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток;
• сульфат магния является источником двухвалентных катионов и сульфата;
• гидрофосфат дикалия используется для стабилизации pH среды.

Состав

Состав нормирован для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

# Acicase эквивалентен кислотному гидролизату казеина.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,12 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Не перегревайте среду.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам и обращению

При работе с пробами воды используйте подходящие методы отбора образцов и выполняйте обработку проб в соответствии с применимыми руководствами и местными стандартами.

После завершения работы загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Ограничения применения

1. Для медленно растущих микроорганизмов требуется более длительная инкубация, чем указано в стандартных условиях.
2. Среда предназначена для проб воды и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов.
3. Для полевых проб воды рекомендуется дополнительная инкубация продолжительностью до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M962-500G
• Наименование: R-2A Agar
• Назначение изделия: агар
• Тип питательной среды: диагностическая
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса упаковки: 500 г
• Конечный pH среды при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• pH: 7,00–7,40
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 1,81 % масс./об.
• Условия стандартной инкубации для оценки культуральных характеристик: 30–35 °C, 24–72 ч
• Рекомендуемая дополнительная инкубация полевых проб воды: до 7 суток

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гель: плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 1,81%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется продолжить инкубацию до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.

* Соответствующие номера WDCM.

*Bacillus sp