Питательная агаризованная среда HiMedia M962-2.5KG Агар R2A представляет собой порошковую среду с конечным значением pH 7,2 ± 0,2. Применяется для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды при длительной инкубации, включая восстановление стрессированных и повреждённых клеток.

Назначение

Среда R2A Agar предназначена для определения гетеротрофного количества микроорганизмов в пробах воды методом подсчёта колоний. Методика позволяет оценивать число живых гетеротрофных бактерий, а также изменения микробной нагрузки при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

Среда рекомендована для определения гетеротрофного количества микроорганизмов методами заливки, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Состав R2A Agar разработан по формуле Reasoner и Geldreich.

Состав

Состав, г/л:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Эквивалент гидролизата казеина кислотного.

Принцип действия и интерпретация результатов

Гетеротрофное количество микроорганизмов, ранее называвшееся стандартным подсчётом на чашках, представляет собой процедуру оценки числа живых гетеротрофных бактерий в воде и контроля изменений их количества во время водоподготовки, в распределительных системах или плавательных бассейнах.

Стрессированные или повреждённые микроорганизмы, подвергшиеся воздействию в процессе водоподготовки, не способны нормально расти на средах с высоким содержанием питательных веществ: быстрорастущие микроорганизмы подавляют их рост. Низкопитательная среда R2A Agar при увеличенной продолжительности инкубации создаёт условия для восстановления и роста таких клеток.

Многие бактерии природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным уровнем питательных компонентов и при температуре ниже стандартной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Acicase, пептон протеозный и дрожжевой экстракт обеспечивают среду источниками азота, углеродистых соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ.
• Декстроза (глюкоза) служит источником энергии.
• Растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов за счёт абсорбции токсичных побочных продуктов метаболизма.
• Пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток.
• Сульфат магния является источником двухвалентных катионов и сульфата.
• Дикалий гидрофосфат используется для стабилизации pH среды.

Результат выражают как количество колониеобразующих единиц (КОЕ) на объём исследованной пробы.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,12 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Не перегревайте среду.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Исследуемые образцы

Тип образца: пробы воды.

Для отбора и обработки проб воды следует применять соответствующие методы, руководствуясь действующими рекомендациями и местными нормативными документами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Для медленно растущих микроорганизмов требуется более длительная инкубация, чем установленная стандартной процедурой.
• Среда предназначена для проб воды и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Условия определения: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 1,81 % при 25 °C.

Реакция среды: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется продолжить инкубацию до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

* Соответствующие номера WDCM.
** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.
^ Ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.

Ранее обозначался как Aspergillus niger.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Наименование: M962-2.5KG Агар R2A
• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 2,5 кг
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение: животное
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• pH 1,81 % водного раствора: 7,00–7,40
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Условия хранения и срок годности

Храните продукт в плотно закрытой ёмкости при температуре 10–30 °C, а приготовленную среду — при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия ёмкость необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хран