HiMedia M962-100G Агар R2A

Питательная микробиологическая среда HiMedia M962-100G Агар R2A в порошке, массой 100 г. Применяется для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды при длительной инкубации и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов.

Назначение

Агар R2A предназначен для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды с использованием увеличенного времени инкубации. Методика позволяет оценивать количество живых гетеротрофных бактерий и отслеживать изменения микробиологического состава воды при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

Среда предназначена для водных образцов, включая восстановление стрессированных или повреждённых микроорганизмов, которые могут не расти на высокопитательных средах. Тип образца: пробы воды.

В отличие от высокопитательных сред, агар R2A содержит пониженное количество питательных компонентов и используется при более длительной инкубации; такой подход снижает преимущество быстрорастущих микроорганизмов и способствует восстановлению повреждённых клеток.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

# Acicase эквивалентен кислотному гидролизату казеина.

Принцип действия и интерпретация

Общее количество гетеротрофных микроорганизмов, ранее обозначавшееся как стандартное количество микроорганизмов на чашке, представляет собой метод оценки числа живых гетеротрофных бактерий в воде. Агар R2A применяется для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов методами заливки чашек, поверхностного посева или мембранной фильтрации.

Среда R2A разработана по рецептуре Reasoner и Geldreich. Микроорганизмы, подвергшиеся стрессу или повреждению во время водоподготовки, могут не расти на высокопитательных средах, поскольку быстрорастущие микроорганизмы подавляют их рост. Использование низкопитательной среды R2A с увеличенным временем инкубации позволяет таким микроорганизмам восстанавливаться и формировать колонии.

Многие бактерии природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным уровнем питательных компонентов и при температурах ниже стандартной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Acicase, пептон протеозный и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление азотсодержащих и углеродсодержащих соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ.
• Декстроза/глюкоза служит источником энергии.
• Растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов, абсорбируя токсичные побочные продукты метаболизма.
• Пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток.
• Сульфат магния является источником двухвалентных катионов и сульфата.
• Гидрофосфат дикалия используется для балансировки pH среды.

Количество колоний на чашке выражают в КОЕ (колониеобразующих единицах) на объём исследуемой пробы.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 18,12 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо в соответствии с валидированным циклом стерилизации.
4. Не подвергайте среду перегреву.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методики посева и инкубации

Агар R2A рекомендован для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов следующими способами:

• метод заливки чашек;
• метод поверхностного посева;
• метод мембранной фильтрации.

Культуральные характеристики определяют с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для полевых проб воды рекомендуется продолжить инкубацию до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

Для медленнорастущих микроорганизмов требуется более длительное время инкубации, чем указано в стандартных условиях.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 1,81%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для полевых проб воды рекомендуется дополнительная инкубация продолжительностью до 7 суток для подтверждения отсутствия микроорганизмов.

* Соответствующие номера WDCM.

** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

^ Ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.

# Ранее обозначался как *Aspergillus niger