Агаровая питательная среда Триптонно-желчный агар HiMedia M961-500G (уп/500 гр) с итоговым pH 7,2 ± 0,2 при 25 °C. Триптонно-желчный агар применяется для быстрого выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах методом прямого модифицированного посева, преимущественно в образцах мяса и мясных продуктов.

Назначение

Триптонно-желчный агар рекомендован для быстрого выявления и подсчёта Escherichia coli в пищевых продуктах с использованием модифицированного метода прямого посева на чашки.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: стандартный
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Соответствие: ГОСТ Р 52426-2005
• Масса упаковки: 500 г
• Происхождение: животное
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)

Состав

Состав рассчитан и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Триптонно-желчный агар разработан Андерсоном и Бэрд-Паркером. Международная комиссия по микробиологическим спецификациям пищевых продуктов сравнила метод наиболее вероятного числа (MPN) и метод прямого посева Андерсона—Бэрд-Паркера (DPM) для количественного определения Escherichia coli в сыром мясе.

Метод прямого посева обеспечивает:

• меньшую вариабельность результатов по сравнению с методом наиболее вероятного числа;
• более эффективное восстановление микроорганизмов в замороженных образцах;
• более быстрое получение результата;
• использование меньшего количества питательной среды.

Метод прямого посева позволяет выявлять и подсчитывать как анаэрогенные штаммы E. coli, так и штаммы с поздней ферментацией лактозы, которые могут быть пропущены методом наиболее вероятного числа; доля таких штаммов составляет около 10 %.

Формуляция рекомендована комитетом ISO для количественного определения E. coli. Холбрук и соавторы модифицировали метод прямого посева для выявления и количественного определения сублетально повреждённых клеток E. coli в замороженных, сушёных, термически обработанных и кислых пищевых продуктах.

Этап ресусцитации снижает высокую концентрацию сахара, содержащегося в посевном материале, до уровня, не препятствующего образованию индола. Высокая концентрация сахара ингибирует синтез триптофаназы — фермента, участвующего в образовании индола.

Некоторые микроорганизмы расщепляют аминокислоту триптофан с помощью ферментов, обеспечивающих образование индола гидролитическим путём. Образовавшийся индол выявляют с помощью реактива Ковача или реактива Эрлиха. Индол взаимодействует с альдегидом, содержащимся в соответствующем реактиве, с образованием красного окрашивания в спиртовом слое. Спиртовой слой извлекает и концентрирует красный комплекс.

Индол-положительные микроорганизмы, отличные от E. coli, подавляются желчными солями и повышенной температурой инкубации.

Приготовление питательной среды

1. Взвесьте 36,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

• Тип образцов: пищевые продукты
• Рекомендуемые образцы: мясо и мясные продукты

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Из-за различий в пищевых потребностях некоторые штаммы могут плохо расти на этой питательной среде.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• Реакция: реакция 3,65%-ного водного раствора при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• Измеренное значение pH: 7,2 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 °C в течение 24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотно закрывайте флакон после каждого использования для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Соблюдайте установленные лабораторные процедуры обращения с инфекционными материалами. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.