TN агар для выделения Vibrio spp. HiMedia M950-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда TN агар для выделения Vibrio spp. производства HiMedia с сертификатом ФСЗ 2009/03709. Применяется для изоляции и культивирования вибрионов из проб пищевых продуктов; состав разработан в соответствии с рекомендациями APHA.

Принцип работы и интерпретация

Представители рода Vibrio определяются как грамотрицательные беспоровые палочки, имеющие прямую форму или единственный жесткий изгиб. Основными патогенами человека являются виды Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus и Vibrio mimicus.

V. cholerae (типовой вид рода) является возбудителем вспышек и эпидемий холеры. Данный вид может быть дифференцирован от других видов Vibrio (за исключением V. mimicus) благодаря обязательной потребности в ионах натрия (Na⁺).

В составе среды TN агар:

• Казеиновый энзимный гидролизат обеспечивает азот- и углеродсодержащие соединения, серу, витамины комплекса B и другие необходимые питательные вещества.
• Хлорид натрия повышает селективность среды.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и первичный посев

1. Взвесьте 25 г образца пищевого продукта (например, морепродуктов или овощей), измельчите или нарежьте на мелкие части и распределите по двум емкостям.
2. В первую емкость добавьте 225 мл щелочной пептонной воды (M618), во вторую — 225 мл желатин-фосфатно-солевого бульона.
3. Инкубируйте при температуре 35 ± 2 °C в течение 6–8 часов.
4. Перенесите петлей с поверхности роста каждой бульонной культуры на две среды: агар TCBS (M189) и желатин-фосфатно-солевый агар (M921).
5. Инкубируйте при 35 ± 2 °C в течение 18–24 часов.

Выделение и подтверждение

1. Пересейте 3–4 колонии с каждой чашки на TN агар.
2. Для дальнейшего подтверждения роста с TN агара инокулируйте скошенные части железо-сахарозного агара Клиглера (M078), выполнив укол в столбик.
3. После инкубации культуры V. cholerae характеризуются щелочной реакцией (красный цвет) на скосе и кислой реакцией (желтый цвет) в столбике; образование газа и почернение столбика (продукция H₂S) отсутствуют.
4. Для предполагаемых штаммов V. cholerae с TN агара проводится «струнный тест» (string test).

Приготовление и стерилизация

1. Растворите 35 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите и залейте среду в наклонном положении (длинные скосы).

Технические характеристики

Свойства порошка и готовой среды

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках в виде длинных скосов).
• Реакция: pH 7,2 ± 0,2 (для 3,5% водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Область применения

Среда соответствует методическим рекомендациям Роспотребнадзора МР 02.009-06. Саратов. 2006 и используется для культивирования вибрионов из пищевых продуктов.