TN агар для выделения Vibrio spp. HiMedia M950-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда TN агар для выделения Vibrio spp. HiMedia M950-500G (уп/500 гр) — агаровая среда с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения и культивирования вибрионов из пищевых продуктов, включая морепродукты и овощное сырьё.

Назначение и область применения

TN агар предназначен для выделения и культивирования представителей рода Vibrio из образцов пищевых продуктов.

Продукт применяется для:

• микробиологического контроля пищевых продуктов;
• выделения вибрионов из морепродуктов и овощного сырья;
• последующего подтверждения предположительно положительных культур Vibrio cholerae.

Изделие: агаровая питательная среда.
Тип питательной среды: элективный.
Регистрационные и методические документы: ФСЗ 2009/03709; Методические рекомендации Роспотребнадзора МР 02.009-06, Саратов, 2006.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Представители рода Vibrio — грамотрицательные неспорообразующие палочки прямой формы или с одним жёстким изгибом. К документированным патогенным для человека видам относятся Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus и Vibrio mimicus.

Vibrio cholerae — типовой вид рода Vibrio и возбудитель вспышек и эпидемий холеры.

Vibrio cholerae можно дифференцировать от других видов рода Vibrio, за исключением Vibrio mimicus, по обязательной потребности в ионах натрия (Na⁺). TN агар сформулирован в соответствии с методикой Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA) для культивирования видов Vibrio из пищевых продуктов.

Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает среду азотистыми и углеродистыми соединениями, серой, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами для роста микроорганизмов. Хлорид натрия повышает элективность среды.

Методика подготовки среды и проведения анализа

Подготовка TN агара

1. Взвесьте 35 г сухой среды.
2. Суспендируйте 35 г среды в 1000 мл дистиллированной воды.
3. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду по пробиркам.
5. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа).
6. Оставьте среду в пробирках для застывания в наклонном положении, формируя длинные скошенные поверхности.

Пробоподготовка и выделение вибрионов

1. Отвесьте 25 г образца пищевого продукта, например морепродуктов или овощей.
2. Измельчите образец или нарежьте его на мелкие части и распределите в две ёмкости.
3. В первую ёмкость добавьте 225 мл щелочной пептонной воды (M618).
4. Во вторую ёмкость добавьте 225 мл желатин-фосфатно-солевого бульона.
5. Инкубируйте обе культуры при температуре 35 ± 2 °C в течение 6–8 ч.
6. Петлёй перенесите материал с поверхности роста каждой бульонной культуры на две чашечные среды: тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозный агар (TCBS, M189) и желатин-фосфатно-солевой агар (M921).
7. Инкубируйте посевы при температуре 35 ± 2 °C в течение 18–24 ч.
8. Пересевайте по 3–4 колонии с каждой чашечной среды на TN агар.
9. Рост на TN агаре дополнительно подтверждайте посевом на скошенную поверхность агара Клиглера с железом (M078) с проколом столбика среды.
10. После инкубации культуры V. cholerae должны иметь щелочную скошенную поверхность красного цвета и кислый столбик жёлтого цвета; газ не образуется, почернение столбика, связанное с образованием H₂S, отсутствует.
11. Предположительно положительные штаммы V. cholerae, выделенные на TN агаре, исследуйте тестом на образование нити.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде длинных скошенных поверхностей образуется прозрачный гель светло-жёлтого цвета или от прозрачного до слегка опалесцирующего.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 3,5 % масс./об. при температуре 25 °C.

pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M950-500G
• Форма выпуска: упаковка 500 г
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Назначение изделия: агар
• Тип питательной среды: элективный
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,