Солевой агар HiMedia M942-500G (уп/500 гр)

Питательная среда солевой агар HiMedia M942-500G для выявления альфа-токсина у Clostridium perfringens. Применяется для анализа клинических образцов (фекалий), а также проб пищевых продуктов и молочной продукции; содержит хлорид натрия для обеспечения необходимых ионов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда используется для измерения гемолитической активности альфа-токсина. Термолабильный энтеротоксин, вырабатываемый только спорулирующими клетками, вызывает основные симптомы диареи при отравлении перфрингеном и высвобождается в кишечнике in vivo. Таким образом, альфа-токсин служит индикатором присутствия Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Хлорид натрия в составе обеспечивает необходимые ионы. Эритроциты (добавляются в среду отдельно) позволяют исследовать гемолитические реакции, что косвенно способствует обнаружению альфа-токсина.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 23,5 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. После охлаждения до 45–50 °C добавьте кровь до достижения конечной концентрации 5 % об/об.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Дополнительный тест на альфа-токсин

1. Чашки, содержащие 7 мл среды, высушивают в течение ночи при комнатной температуре и хранят при +4 °C до использования.
2. Непосредственно перед использованием в агаре с помощью шаблона вырезают лунки: периферийные лунки (на дубликатах чашек) располагают с интервалом 3 см друг от друга и 2 см от края чашки.
3. Вырезают две дополнительные лунки в центре чашки с интервалом 3 см.
4. Периферийные лунки заполняют неразбавленным экстрактом (экстракция альфа-токсина) и восемью последовательными двухкратными разведениями экстракта.
5. Для проверки того, вызван ли гемолиз именно альфа-токсином, часть разведения 1:2 смешивают с альфа-токсином C. perfringens и с диагностической антисывороткой к C. perfringens типа A, содержащей альфа-токсин, и помещают в две центральные лунки.
6. Чашки инкубируют 24 часа при +35 °C.
7. Оценивают зоны гемолиза вокруг лунок. Зона гемолиза диаметром 1 мм считается значимой.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов с добавлением эритроцитов.

Область применения и ограничения

Типы образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные продукты.

Ограничения

Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования в диагностике in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с клиническими образцами.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию и/или сжиганию. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы.