Солевой агар HiMedia M942-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда Солевой агар HiMedia M942-500G (уп/500 гр) — агаровая основа для выявления альфа-токсина Clostridium perfringens с добавлением эритроцитов в конечной концентрации 5 % об./об. Применяется для исследования клинических образцов, пищевых и молочных продуктов, а также для оценки гемолитической активности альфа-токсина; замороженные подозрительные пищевые образцы могут привести к потере жизнеспособности клеток Clostridium perfringens.

Назначение

Солевой агар HiMedia M942-500G предназначен для выявления альфа-токсина у спорулирующих клеток Clostridium perfringens. Солевая агаровая основа с кровью используется для определения гемолитической активности альфа-токсина.

Альфа-токсин может применяться как показатель присутствия Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Жизнеспособность клеток Clostridium perfringens утрачивается при замораживании подозрительных пищевых образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Термолабильный энтеротоксин, вырабатываемый только спорулирующими клетками, вызывает основные симптомы диареи при отравлении Clostridium perfringens. Предположительно, энтеротоксин высвобождается в кишечнике в организме хозяина спорулирующими микроорганизмами.

Хлорид натрия обеспечивает поступление необходимых ионов. Эритроциты добавляют в питательную среду для выявления гемолитических реакций, что косвенно помогает обнаружить альфа-токсин.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,5 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте кровь до конечной концентрации 5 % об./об.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Дополнительный тест на гемолитическую активность

1. Налейте по 7 мл среды в чашки и высушивайте в течение ночи при комнатной температуре.
2. Храните подготовленные чашки при 4 °C до использования.
3. Непосредственно перед использованием вырежьте в агаре тестовые лунки с помощью шаблона. Расстояние между лунками должно составлять 3 см, расстояние от края чашки — 2 см.
4. Сделайте ещё две лунки на расстоянии 3 см друг от друга рядом с центром чашки.
5. В периферийные лунки дублирующих чашек внесите неразбавленный экстракт для экстракции альфа-токсина и восемь последовательных двукратных разведений экстракта.
6. Для определения того, вызван ли гемолиз экстрактом именно альфа-токсином, смешайте часть разведения экстракта 1:2 с альфа-токсином C. perfringens, а другую часть — с диагностической антисывороткой типа A к C. perfringens, содержащей альфа-токсин.
7. Поместите полученные смеси в две центральные лунки.
8. Инкубируйте чашки в течение 24 ч при 35 °C.
9. Осмотрите зоны гемолиза вокруг лунок.

Зона гемолиза размером 1 мм считается значимой.

Типы образцов

• Клинические образцы: кал.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Основная среда образует прозрачный гель светло-жёлтого цвета. После добавления эритроцитов в чашках Петри образуется непрозрачный гель красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 2,35 % масс./об. при 25 °C.

• pH: 7,0 ± 0,2.

pH

6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с добавленными эритроцитами.

Технические характеристики

• Артикул: M942-500G.
• Фасовка: 500 г.
• Назначение изделия: агар.
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Хранение и срок годности

Храните сухую среду в плотно закрытой упаковке при температуре 10–30 °C. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрывать и хранить в сухом состоянии для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте упаковку. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики среды гарантируются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Требования безопасности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, указанным в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.