HiMedia M936-500G Основа бульона с цианидом калия без KCN

Сухая порошкообразная основа питательной среды HiMedia M936-500G Основа бульона с цианидом калия без KCN с конечным pH 7,6 ± 0,2. Основа предназначена для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae по устойчивости к цианиду калия, при этом для видовой идентификации требуются дополнительные биохимические и серологические тесты.

Назначение

Основа бульона с цианидом калия используется после добавления раствора цианида калия для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae по способности расти в присутствии цианида калия.

Продукт поставляется без KCN; раствор цианида калия добавляют асептически после стерилизации базовой среды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 13,86 г сухой основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разлейте среду порциями по 100 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до комнатной температуры.
6. Асептически добавьте к каждой порции базовой среды объёмом 100 мл 1,5 мл стерильного 0,5%-ного раствора цианида калия.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте приготовленную среду порциями по 1 мл.

Меры предосторожности

Цианид калия смертельно токсичен. При работе с раствором цианида калия необходимо соблюдать особую осторожность. Запрещается набирать раствор цианида калия ртом с помощью пипетки.

Принцип действия и интерпретация

Одним из тестов, применяемых для идентификации бактерий, является определение способности микроорганизма расти в присутствии цианида.

Протеозопептон обеспечивает среду азотистыми соединениями, серой и микроэлементами, необходимыми для роста. Фосфаты выполняют буферную функцию. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Цианид калия ингибирует рост многих бактерий, включая представителей родов Salmonella, Shigella и Escherichia. Представители групп Klebsiella, Citrobacter и Proteus хорошо растут в присутствии цианида калия.

Основа бульона с цианидом калия первоначально была разработана Moeller, затем модифицирована Edwards и Ewing, а также Edwards и Fife.

Ограничения интерпретации

Реакции в бульоне с цианидом калия недостаточны для видовой идентификации микроорганизма. Для установления вида необходимо выполнять дополнительные биохимические и серологические тесты.

Не следует использовать слишком большую посевную дозу: сам инокулят может вызвать помутнение среды и/или образование осадка на дне пробирки, что способно привести к ложноположительной интерпретации результата.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета без осадка.
• Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 1,39 % масс./об. при 25 °C.
• pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления стерильного 0,5%-ного раствора цианида калия и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Стабильность и хранение

• Хранение сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• При температуре 4 °C среда с цианидом калия обычно сохраняет стабильность до 4 недель.
• Повышенная температура ускоряет разрушение KCN в среде и/или испарение цианида.

Обезвреживание цианида перед автоклавированием

Перед автоклавированием цианид калия необходимо разрушить добавлением в каждую пробирку кристалла сульфата железа и 0,1 мл 40%-ного гидроксида калия.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M936-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2
• Рабочая концентрация для приготовления: 13,86 г/1000 мл
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Материал упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Температура хранения сухой основы: ниже 30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Область применения

Среда применяется в микробиологических и санитарно-бактериологических лабораториях для:

• дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae;
• определения устойчивости микроорганизмов к цианиду калия;
• проведения дополнительных биохимических исследований при идентификации бактерий.

Культуральную реакцию в бульоне с цианидом калия используют только как один из этапов идентификации; самостоятельное определение вида по этому тесту не проводят.

Техническое отличие методики

В отличие от базовой среды без селективной добавки, приготовленная среда содержит стерильный 0,5%-ный раствор цианида калия, который ингибирует чувствительные микроорганизмы и позволяет оценивать устойчивость к KCN.

Условия применения

Для получения корректного результата необходимо:

• соблюдать асептические условия при добавлении раствора цианида калия;
• не использовать чрезмерно плотный инокулят;
• учитывать возможное образование мутности или осадка из-за самой посевной дозы;
• после инкубации подтверждать вид микроорганизма дополнительными биохимическими и серологическими методами;
• соблюдать специальные требования безопасности при работе с цианидом калия.