Основа агара М 17 HiMedia M929-500G (уп/500 гр)

Питательная среда Основа агара М 17 HiMedia M929-500G (уп/500 гр) производства HiMedia предназначена для культивирования молочных стрептококков и имеет конечный pH 7,1 ± 0,2. Основа агара М 17 применяется для подсчёта молочных стрептококков, анализа молочных бактериофагов методом бляшкообразования и селективного выделения Streptococcus thermophilus из йогурта.

Назначение

• Тип питательной среды: элективный
• Назначение изделия: основа
• Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы
• Применение: культивирование молочных стрептококков, их подсчёт и изучение молочных бактериофагов методом бляшкообразования
• Дополнительное применение: культивирование и поддержание заквасочных культур для производства сыра и йогурта
• Форма выпуска: порошок
• Масса упаковки: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03706

Основа агара M17 предназначена для культивирования и количественного определения молочных стрептококков, изучения морфологии бляшек и лизогении. Среда также используется для выявления стрептококковых мутантов, не ферментирующих лактозу.

Состав

Состав приведён для 1 л среды.

# Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик; компонент эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Среда M17 основана на рецептуре, описанной Terzaghi и Sandine для культивирования и количественного определения молочных стрептококков и их бактериофагов. Наличие бактериофагов выявляют по появлению характерных бляшек на фоне бактериального роста.

Питательные функции компонентов:

• пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают углеродистые и азотистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины группы B и другие факторы роста;
• лактоза служит ферментируемым углеводом;
• аскорбиновая кислота стимулирует рост молочных стрептококков;
• сульфат магния обеспечивает микроорганизмы необходимыми ионами.

Динатрий-β-глицерофосфат поддерживает pH выше 5,7. Поддержание pH имеет критическое значение: снижение pH приводит к повреждению молочных стрептококков и уменьшению их восстановления. Глицерофосфат не образует осадка с кальцием, необходимым для анализа молочных бактериофагов. Динатрий-глицерофосфат подавляет рост Lactobacillus bulgaricus.

Среда M17 рекомендована Международной молочной федерацией для селективного количественного определения Streptococcus thermophilus в йогурте и APHA для культивирования молочных стрептококков.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,25 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19 г динатрий-β-глицерофосфата.
3. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в необходимом объёме.

Методика культивирования и подсчёта стрептококков

Для количественного определения стрептококков рекомендуется посев в толщу среды или прокалыванием расплавленной и охлаждённой до 50–55 °C агаризованной среды.

Условия инкубации:

• Температура: 42 °C
• Продолжительность: 24 ч

При указанных условиях все выросшие колонии могут относиться к стрептококкам. Увеличение продолжительности инкубации или снижение температуры может привести к морфологическим изменениям колоний, затрудняющим их распознавание.

Лактозоположительные колонии стрептококков становятся видимыми через 15 ч. Через 5 суток диаметр таких колоний может достигать примерно 3–4 мм. Диаметр лактозоотрицательных колоний составляет около 1 мм.

Технические характеристики

• Концентрация при контроле реакции: 3,33 % м/об водного раствора
• Конечный pH: 7,1 ± 0,2
• Рабочий диапазон pH по контролю качества: 6,90–7,30
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаровым гелем
• Внешний вид порошка: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением динатрий-β-глицерофосфата.

* Соответствующие номера WDCM.

Lactiplantibacillus plantarum ранее обозначался как Lactobacillus plantarum.

Ограничения применения

Поддержание pH выше 5,7 имеет критическое значение. Снижение pH приводит к повреждению молочных стрептококков и уменьшению их восстановления.

Более длительная инкубация или культивирование при температуре ниже 42 °C может вызывать морфологические изменения колоний и затруднять их идентификацию.

Контроль качества

Внешний вид

Порошок от кремового до жёлтого цвета, однородный, свободно текучий.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,0 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 3,33 % м/об водного раствора при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Ёмкость: плотно закрытая
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Безопасность

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими инструкциями. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо обезвредить автоклавированием и/или сжиганием.

Утилизацию инфекционных материалов выполняйте в соответствии с установленными лабораторными процедурами. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы согласно действующим методикам лабораторной работы.