Основа агара М 17 HiMedia M929-500G (уп/500 гр)

Элективная сухая среда Основа агара М 17 HiMedia M929-500G (уп/500 гр) производства HiMedia. Рекомендуется для культивирования молочных стрептококков и проведения анализа бляшкообразования молочных бактериофагов.

Область применения

Среда используется для выделения и количественного учета молочных стрептококков, в том числе Streptococcus thermophilus из йогурта, а также для культивирования и поддержания стартовых культур при производстве сыра и йогурта. Применяется для анализа пищевых продуктов и молочной продукции, позволяет обнаруживать мутанты стрептококков, не ферментирующие лактозу, и изучать морфологию бляшек и лизогению бактериофагов.

Принцип измерения

Среда M17 разработана на основе рецептуры Terzaghi и Sandine. Молочные стрептококки являются требовательными к питательным веществам, поэтому состав среды включает комплекс компонентов для оптимального роста:

• Пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и HM пептон B: обеспечивают углеродные и азотистые соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины группы B и другие факторы роста.
• Лактоза: ферментируемый углевод.
• Аскорбиновая кислота: стимулирует рост молочных стрептококков.
• Сульфат магния: источник необходимых ионов.
• Динатрий-β-глицерофосфат (добавляется отдельно): поддерживает уровень pH выше 5,7. Это критически важно, так как более низкий pH приводит к повреждению клеток и снижению выхода молочных стрептококков. Также глицерофосфат подавляет рост Lactobacillus bulgaricus и не образует осадка с кальцием, что необходимо для анализа бактериофагов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,25 г основы агара в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19 г динатрий-β-глицерофосфата.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте по чашкам Петри.

Посев и инкубация

1. Для количественного учета стрептококков рекомендуется метод массового посева или метод «штыкования» (внесение пробы в агар, расплавленный и охлажденный до 50–55 °C).
2. Инкубируйте посевы при температуре 42 °C в течение 24 часов. При таких условиях все выросшие колонии, как правило, являются стрептококками.
3. Важно: более длительная инкубация или более низкие температуры могут вызвать морфологические изменения колоний, что затруднит их идентификацию.

Интерпретация результатов

• Лактозоположительные колонии: становятся видимыми через 15 часов; через 5 дней могут достигать диаметра 3–4 мм.
• Лактозоотрицательные колонии: имеют диаметр около 1 мм.
• Бактериофаги: присутствие фагов определяется по появлению характерных бляшек на фоне бактериального роста.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические свойства и контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция (3,33% в/в водный раствор при 25 °C): pH 7,1 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением динатрий-β-глицерофосфата.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Утилизация: использованные среды и материалы, контактировавшие с образцами, подлежат деконтаминации, автоклавированию или сжиганию согласно лабораторным протоколам работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности и ограничения

• Требуется использование средств индивидуальной защиты: защитные перчатки, одежда, средства защиты глаз и лица.
• Ограничение: строгое соблюдение уровня pH является критическим фактором; снижение pH приводит к повреждению клеток и существенному снижению выхода молочных стрептококков.

Дополнительная информация

• Сертификат: ФСЗ 2009/03706.
• Тип среды: Элективная основа.