Агар для качественной и количественной оценки лактококков HiMedia M926-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная агаризованная среда Агар для качественной и количественной оценки лактококков HiMedia M926-500G (уп/500 гр) с конечным pH 6,0 ± 0,2. Применяется для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков в клинических и пищевых образцах; предназначена для профессионального применения in vitro.

Назначение

Среда предназначена для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков, включая Lactococcus lactis, подвиды cremoris и diacetylactis. Среда рекомендована для дифференциального подсчёта молочнокислых стрептококков.

Тип питательной среды: диагностическая
Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: агар
Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип дифференциации

Наиболее распространённые микроорганизмы, используемые в молочной промышленности в качестве заквасочных культур, относятся к молочнокислым стрептококкам. К этой группе принадлежат Lactococcus lactis и его подвиды cremoris и diacetylactis. Дифференциация выполняется по биохимическим признакам, основными из которых являются гидролиз аргинина, а также образование диацетила и ацетоина.

Молочнокислые стрептококки, ферментирующие лактозу, образуют кислоту и жёлтые колонии. Lactococcus lactis первоначально образует кислоту, но позднее приобретает фиолетово-пурпурную окраску вследствие выделения аммиака из аргинина. Lactococcus lactis subsp. diacetylactis образует более интенсивную пурпурную окраску по сравнению с Lactococcus lactis. Этот подвид использует суспендированный цитрат кальция, поэтому колонии, разрушающие цитрат, формируют прозрачные зоны на фоне мутной среды.

Пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B служат источниками необходимых питательных веществ, включая углерод, азот, аминокислоты и витамины. Лактоза является ферментируемым углеводом. L-аргинин и цитрат кальция выступают специфическими субстратами. Бромкрезоловый пурпурный используется как индикатор pH.

Среда Reddy's Differential Agar, Modified (Lactic Streak Agar) для качественной и количественной дифференциации молочнокислых стрептококков первоначально описана Reddy и соавторами, а затем модифицирована Mullan и Walker. В описании методики также указано применение среды для дифференциального подсчёта молочнокислых стрептококков по рекомендациям APHA.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Диспергируйте среду с использованием блендера.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Обозначение A соответствует давлению 10 фунтов; ориентировочное давление при автоклавировании составляет ≈0,069 МПа (≈0,69 бар).

Образцы

Тип образца:

• клинические образцы — слизистая оболочка кишечника;
• пищевые образцы.

Пробоподготовка и количественное определение

1. Для количественного определения приготовьте десятичные разведения культур.
2. Высейте разведения поверхностным методом на чашки с агаризованной средой.
3. Инкубируйте при 32 °C в течение 36–40 ч.
4. Подсчитайте жёлтые колонии подвида cremoris.
5. Продолжите инкубацию чашек в течение 4 суток.
6. Подсчитайте общее количество колоний с прозрачными зонами, относящихся к подвиду diacetylactis.
7. Вычтите количество колоний подвида diacetylactis из общего количества колоний, чтобы определить численность Lactococcus lactis в смеси.

Ограничения метода

• Для исключения ошибочных результатов необходимо использовать хорошо изолированные колонии.
• Для подтверждения результата следует выполнить биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтая опалесцирующая среда с зеленоватым оттенком.

Реакция

Реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,0 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 32 °C в течение до 4 суток.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования ёмкость необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• При работе использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости следует обращаться к индивидуальным паспортам безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с образцом, следует обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.