Желатиновый агар с фосфатным буфером HiMedia M921-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Желатиновый агар с фосфатным буфером HiMedia M921-500G (уп/500 гр) — не селективный агар для культивирования и характеристики Vibrio cholerae из пищевых продуктов. Среда применяется для высева обогащённых культур холерных вибрионов, имеет конечный pH 7,2 ± 0,2 при 25 °C и соответствует ФСЗ 2009/03705 и МР 02.009-06.Саратов.2006.

Назначение и область применения

Питательная среда предназначена для культивирования и характеристики Vibrio cholerae из пищевых продуктов, включая морепродукты и овощи. Желатиновый агар с фосфатным буфером используется для высева обогащённых культур Vibrio cholerae.

• Тип питательной среды: диагностическая
• Назначение изделия: агар
• Тип среды: не селективная
• Тип образца: пищевые продукты
• Сертификат: ФСЗ 2009/03705
• Методические документы: МР 02.009-06.Саратов.2006
• Основа рецептуры: состав сформулирован по рекомендациям APHA для посева обогащённых культур Vibrio cholerae, полученных из морепродуктов или овощей

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным эксплуатационным параметрам.

Принцип действия и интерпретация

Vibrio cholerae — несолелюбивый представитель рода Vibrio, который не способен расти в средах с концентрацией хлорида натрия более 5–6 % и может расти в средах без NaCl.

Заражение человека связано с употреблением загрязнённых воды или пищевых продуктов. V. cholerae является этиологическим агентом секреторной диареи, распространяющейся фекально-оральным путём. Основной фактор вирулентности V. cholerae — холерный токсин CT, вызывающий главный симптом холеры.

Желатиновый агар с фосфатным буфером представляет собой не селективную среду для высева обогащённых культур V. cholerae, полученных из морепродуктов или овощей.

Штаммы Vibrio, продуцирующие фермент желатиназу, разрушают желатин и формируют небольшие прозрачные колонии с мутным ореолом. Организмы, не продуцирующие желатиназу, образуют спутниковый рост и могут окружать колонии V. cholerae на этой среде. Гидрофосфат дикалия буферизует среду, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,0 г сухой среды в 1000 мл тёплой очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду в пробирки или колбы в необходимом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.

Пробоподготовка и посев

1. Для обогащения и последующего высева взвесьте 25,0 г образца и поместите в две ёмкости вместимостью 500 мл каждая.
2. Овощи или морепродукты измельчите до небольших кусочков.
3. В одну ёмкость добавьте 225 мл бульона GPS (M618), во вторую — такое же количество щелочной пептонной воды, и перемешайте содержимое обеих ёмкостей.
4. Инкубируйте каждый бульон при температуре 35 ± 2 °C в течение не более 8 ч.
5. При необходимости определите количество бактерий методом наиболее вероятного числа (MPN).
6. Подготовьте чашки с сухими средами, например с агаром TCBS (M189) и агаром GPS (M921). Дополнительно могут использоваться селективные среды: агар с целлобиозой, полимиксином и колистином (CPC) (M1241), а также агар с додецилсульфатом натрия, полимиксином и сахарозой (SDS) (M1155).
7. С поверхности роста каждой бульонной культуры выполните штриховой посев на две чашки с питательными средами.
8. Инкубируйте посевы в течение ночи при 35 °C в течение 18–24 ч.
9. С каждой чашки выполните пересев на скошенную поверхность агара TN (M950) или уколом в среду для определения подвижности (M260).
10. Инкубируйте пересевы в течение ночи при температуре 35 ± 2 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный свободно текучий порошок от не совсем белого до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакцию определяют для 4%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C.

• Реакция 4%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Ограничения применения

1. Перед измерением pH приготовленной среде необходимо выдержать время для стабилизации. Если pH измерен непосредственно после приготовления и выходит за пределы спецификации, повторите измерение через 24 ч для получения значения установленного диапазона.
2. Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Условия обращения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с действующими инструкциями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности на материалы.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: от 10 до 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: от 20 до 30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая проветриваемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Эксплуатационные характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

Материалы, контактировавшие с образцами, следует обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками обращения с инфекционными материалами.

Технические характеристики