Основа дигидролазного бульона HiMedia M915-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Основа дигидролазного бульона HiMedia M915-500G (уп/500 г). Рекомендуется для изучения дигидролазной реакции Vibrio parahaemolyticus; сертификат ФСЗ 2009/03705.

Принцип измерения

Среда предназначена для дифференциации видов Vibrio. Виды Vibrio утилизируют декстрозу, что приводит к снижению pH, и индикатор бромкрезоловый пурпурный меняет цвет среды на жёлтый.

Для проведения анализа среда дополняется L-аргинином, который служит субстратом для дигидролазной реакции. Фермент дигидролаза превращает L-аргинин в путресцин. Также путресцин может образовываться через систему декарбоксилазы: L-аргинин подвергается декарбоксилированию с образованием агматина, который затем катализируется ферментом агматин-дигидролазой до путресцина, CO₂ и аммиака через промежуточное соединение монокарбаминилпутресцин. Образование аминоподобного путресцина повышает pH среды, в результате чего цвет индикатора меняется с жёлтого на пурпурный.

Пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают азотистыми питательными веществами рост бактерий. Декстроза является ферментируемым углеводом, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 43,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды. При необходимости нагреть до полного растворения.
2. Разделить полученный раствор на две части.
3. В первую часть добавить L-аргинин в концентрации 0,5 % (рабочая среда).
4. Вторую часть использовать как базовый бульон-контроль (без L-аргинина).
5. Распределить по 3,0 мл в пробирки с завинчивающимися крышками размером 13 мм × 100 мм.
6. Стерилизовать в автоклаве при температуре 115 °C в течение 15 минут (давление ≈ 0,07 МПа).

Процедура и интерпретация

• Тип образца: чистые изоляты из клинических и пищевых проб.
• Посев: инокулировать исследуемый микроорганизм в пробирку с L-аргинином и в контрольную пробирку с базовой средой.
• Защита от воздуха: для предотвращения ложноположительных результатов (защелачивание поверхности среды из-за контакта с воздухом) рекомендуется защитить инокулированные пробирки слоем стерильного минерального масла.
• Результат: изменение цвета с жёлтого на пурпурный свидетельствует о положительной дигидролазной реакции.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Тип питательной среды: диагностический
• Физическая форма: порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный цвет, прозрачный раствор без осадка
• Внешний вид порошка: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый гомогенный свободнотекущий порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Диапазон pH: 6,60–7,00

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 0,5 % L-аргинина после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 15–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Использование только профессионалами для диагностики in vitro.
• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.
• Утилизация: загрязнённые материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.