HiMedia M912S-500G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков)

Питательная среда HiMedia M912S-500G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков) представляет собой порошковую основу массой 500 г с конечным pH 6,7 ± 0,2. Применяется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-лизин, L-аргинин и L-орнитин; результаты реакции оценивают через 24–96 ч, причём окончательную идентификацию микроорганизмов нельзя проводить только по декарбоксилазным реакциям.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE, полиэтилен высокой плотности)
• Температура: 10–30 °C
• Хранение сухой среды: в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками.

Назначение и область применения

Основа среды для теста на декарбоксилазу применяется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Выработка лизиндекарбоксилазы, аргининдекарбоксилазы и орнитиндекарбоксилазы различными представителями семейства Enterobacteriaceae используется как дополнительный параметр при проведении других биохимических тестов и дифференциации близкородственных микроорганизмов.

Методика основана на работах Moeller по применению аминокислотного декарбоксилазного теста для различения микроорганизмов. Среды для реакции декарбоксилирования лизина применяются для дифференциации представителей родов Salmonella и Shigella. Среда также рекомендована BIS для выявления активности дигидролаз и декарбоксилаз у Vibrio cholerae и других вибрионов.

Биохимическое исследование следует проводить только с чистой культурой после выполнения дифференциальных определений. Декарбоксилазные реакции могут указывать на принадлежность микроорганизма к определённому роду или виду, но не являются достаточными для окончательной и достоверной идентификации.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 9,02 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Разделите приготовленную среду на четыре равные части.
4. Одну часть разлейте по пробиркам без добавления аминокислоты.
5. В три оставшиеся части отдельно добавьте L-лизина гидрохлорид, L-аргинина гидрохлорид и L-орнитина гидрохлорид до конечной концентрации 0,5 % для каждой аминокислоты.
6. Разлейте среду в количестве 3–4 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 20 мин; указанное давление составляет 10 фунтов, ориентировочно ≈0,069 МПа.
8. Для предотвращения ложного подщелачивания поверхности среды перед стерилизацией рекомендуется добавить жидкий парафин слоем высотой около 5 мм.

Принцип измерения и интерпретация

Кишечные бактерии ферментируют декстрозу, что приводит к снижению pH и подкислению среды. Бактерии, образующие лизиндекарбоксилазу, орнитиндекарбоксилазу или аргининдекарбоксилазу, формируют щелочные продукты, повышающие pH.

Через 24–96 ч после посева реакцию оценивают по изменению окраски:

• щелочная реакция, фиолетовая окраска — для бактерий, образующих соответствующую декарбоксилазу;
• кислая реакция, жёлтая окраска — для бактерий, не образующих соответствующую декарбоксилазу.

Посевные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом, покрывая поверхность среды стерильным минеральным маслом, чтобы предотвратить ложное подщелачивание поверхностного слоя. Контрольные пробирки с базовой средой также должны быть инокулированы.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор фиолетового цвета без осадка.

Реакция

Реакция 0,9 % водного раствора, масса/объём, при 25 °C:

• pH: 6,7 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток.

Условия хранения

Сухую среду хранить в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду хранить при 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Техническое отличие методики

В отличие от базовой среды без аминокислот, для оценки специфической декарбоксилазной активности приготовленную основу разделяют на четыре части: одну контрольную и три части с отдельным добавлением L-лизина, L-аргинина и L-орнитина до концентрации 0,5 %.