HiMedia M912S-100G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков)

Компонент питательной среды HiMedia M912S-100G Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков) — порошковая основа для приготовления среды при температуре 10–30 °C. Средство предназначено для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать L-лизин, L-аргинин и L-орнитин; масса упаковки составляет 100 г.

Назначение

Основа среды для теста на декарбоксилазу (Фальков) применяется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты. Реакции декарбоксилазы лизина, аргинина и орнитина используют как дополнительный биохимический признак при различении близкородственных микроорганизмов.

Биохимическое тестирование следует проводить только с чистой изолированной культурой и после выполнения дифференциальных определений. Реакции декарбоксилазы могут указывать на принадлежность микроорганизма к определённому роду или виду, но окончательная идентификация не должна основываться только на результатах реакций декарбоксилирования.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 9,02 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разделите приготовленную среду на четыре равные части.
4. Одну часть разлейте по пробиркам без добавления аминокислот.
5. В три оставшиеся части отдельно добавьте:
   • гидрохлорид L-лизина;
   • гидрохлорид L-аргинина;
   • гидрохлорид L-орнитина.
6. Доведите конечную концентрацию каждой добавленной аминокислоты до 0,5 %.
7. Разлейте среду по 3–4 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
8. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 115 °C в течение 20 мин; давление 10 фунтов на квадратный дюйм соответствует приблизительно 0,069 МПа.
9. Для предотвращения ложного защелачивания поверхности среды перед стерилизацией рекомендуется добавить слой жидкого парафина высотой около 5 мм.

Принцип измерения и интерпретация

Декстроза ферментируется кишечными бактериями, что приводит к снижению pH и закислению среды. Бактерии, продуцирующие декарбоксилазу лизина, орнитина или аргинина, образуют щелочные продукты, повышающие pH.

Реакцию оценивают через 24–96 ч после посева:

• у бактерий, продуцирующих декарбоксилазу, развивается щелочная реакция, наблюдаемая как фиолетовое окрашивание;
• у бактерий, не продуцирующих декарбоксилазу, развивается кислая реакция, сопровождаемая жёлтым окрашиванием.

Для предотвращения ложного защелачивания поверхности инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом, покрывая поверхность среды стерильным минеральным маслом. Контрольные пробирки с базовой средой также должны быть инокулированы.

Первое практическое применение теста на декарбоксилазу аминокислот описал Мёллер для различения различных микроорганизмов. Исследования Мёллера основывались на работах Гейла и Гейла с Эппсом по бактериальным декарбоксилазам аминокислот. Мёллер установил, что образование декарбоксилаз лизина, аргинина и орнитина различными представителями семейства Enterobacteriaceae является важным дополнением к другим биохимическим тестам при дифференциации близкородственных бактерий.

Для дифференциации Salmonella arizonae и Citrobacter Колквист разработал среду, использующую реакцию декарбоксилазы лизина. Позднее Фальков разработал и обосновал применение среды с декарбоксилазой лизина для дифференциации бактерий родов Salmonella и Shigella по воспроизводимым результатам. Среда рекомендована BIS для выявления активности дигидролаз и декарбоксилаз у Vibrio cholerae и других вибрионов.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок жёлтого или зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор фиолетового цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 0,9 % при 25 °C:

• pH: 6,7 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при температуре 35–37 °C в течение до 4 суток.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Упаковка: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Температура: 10–30 °C
• Конечный pH приготовленной среды при 25 °C: 6,7 ± 0,2
• Концентрация порошка для приготовления: 9,02 г/л
• Объём среды при разливе: 3–4 мл на пробирку
• Концентрация добавляемых аминокислот: 0,5 %
• Температура стерилизации: 115 °C
• Время автоклавирования: 20 мин

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: ниже 30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.